卵母细胞玻璃化冷冻保存技术是保存优良畜禽种质资源和珍稀濒危物种的重要手段，也是推动品种改良和胚胎产业化生产的重要技术支撑。冷冻保护剂是玻璃化冷冻的关键媒介，通过降低溶液冰点、增加溶液黏度、抑制冰晶形成和重结晶、缓解渗透损伤等机制发挥保护作用。然而，冷冻保护剂的细胞毒性是玻璃化冷冻中亟待解决的核心问题之一。开发低毒、高效的新型冷冻保护剂已成为提高家畜卵母细胞玻璃化冷冻效率的重要研究方向。文章系统分析了传统冷冻保护剂对卵母细胞的毒性损伤机制，重点综述了小分子渗透调节剂、脂质调节剂、抗氧化剂及细胞骨架稳定剂等新型冷冻保护剂的应用进展，旨在为优化家畜卵母细胞玻璃化冷冻体系提供理论依据和技术参考。

窦前卵泡是卵泡从静息状态向主动生长阶段转变的关键时期，在反刍动物卵巢中数量丰富，具有较高的发育潜能和重要的应用价值。随着体外生殖技术的发展，窦前卵泡体外培养作为一种辅助繁殖手段，已成为反刍动物生殖生物学研究的重要方向。该技术不仅有助于提高家畜繁殖效率，还为濒危物种的生殖资源保存与种群恢复提供了新的思路。然而，目前反刍动物窦前卵泡体外发育仍受多种因素制约，卵泡结构复杂、培养体系稳定性不足以及卵母细胞可育性较低等问题限制了其进一步应用。反刍动物窦前卵泡在体外条件下已可实现一定程度的生长与发育，部分研究获得了桑椹胚等早期胚胎，但整体成熟率和发育潜能仍有限。文章系统综述了反刍动物窦前卵泡的分离方法与体外培养体系，包括机械分离与酶解法、原位培养、二维培养与三维培养，并比较了不同方法和体系在卵泡完整性、适用性及发育效果方面的差异。未来研究应聚焦于分离方法标准化、培养体系优化以及卵泡长期存活与体外成熟机制的解析，以期建立更为高效和稳定的培养体系，推动该技术在家畜生产与濒危物种保护中的应用转化。

微生物是地球上储量最丰富的生物群体，在人类生产、健康和生活中均扮演着重要的角色。传统挖掘培养方案相对落后，只有极少一部分微生物能够被培养。近年来，随着高通量测序技术的飞速发展，培养组学逐渐进入研究者的视野，并在微生物种质资源的开发中显示出巨大的应用潜力，如通过多种培养条件结合基质辅助激光解吸时间飞行质谱（MALDI-TOF MS）技术成功在畜禽肠道、森林或海洋沉积物等环境中筛选出新菌株，为微生物资源挖掘提供了新途径。与此同时，通过构建微生物细胞工厂、解析非模式菌株代谢网络及设计合成微生物群落，为微生物的定向改造与功能强化提供了新思路，如通过构建微生物细胞工厂，可实现青蒿酸、聚羟基脂肪酸酯等产物的高效合成；基于嗜热菌、耐盐放线菌等非模式菌株开发的新型底盘细胞，突破了传统模式菌的代谢限制；而合成微生物群落优化了复杂产物的生物合成途径，提高了微生物的筛选与培养效率。文章综述了近年来微生物种质资源挖掘及选育技术，重点论述了培养组学及其他技术手段的联合应用策略，并整合了微生物细胞工厂构建、非模式菌株改造及合成微生物群落设计等方面的研究进展及其在不同领域的应用与挑战，以期为中国微生物种质资源的挖掘与高效应用提供理论基础与技术参考。

囊型棘球蚴病（cystic echinococcosis，CE）是由细粒棘球绦虫（Echinococcus granulosus，Eg）的幼虫寄生于人及家畜的肝脏、肺脏等组织所引发的严重的人兽共患寄生虫病。当前主要治疗手段为手术切除囊性病变组织并辅以药物化疗。传统药物甲苯咪唑（mebendazole，MBZ）和阿苯达唑（albendazole，ABZ）仅能抑制Eg的生长和繁殖，无法彻底杀灭虫体，致使患者需长期大剂量服用，易引发肝毒性等显著不良反应。因此，亟需研发更新型、安全、高效的替代疗法。近年来，ABZ新型制剂、新型递送方式及联合用药策略成为研究热点。一方面，新型制剂和递送方式研发聚焦提升ABZ的生物利用度并降低毒性：乳剂、盐制剂通过优化药物溶解性增强疗效；ABZ与脂质体、壳聚糖等纳米颗粒或载体结合，构建靶向递送系统，提升病灶药物浓度，并在一定程度上降低全身毒性。另一方面，联合用药策略展现协同效应：ABZ与吡喹酮、氯芬奴隆和α-干扰素等药物或化合物联用，通过多机制干扰寄生虫代谢，增强杀虫效果。但目前尚未研发出具有突破性的迭代治疗产品。笔者通过综述ABZ在治疗CE方面的研究动态，分析ABZ不同治疗方式的优势与不足，旨在为未来药物研发以及临床治疗方案的优化提供科学、可靠的参考依据。

玉米赤霉烯酮（zearalenone，ZEA）又称为F-2毒素，是由镰刀菌属产生的一类具有类雌激素毒性的真菌性毒素，常见于玉米、小麦、豆粕等谷物及其副产品中。动物摄入被ZEA污染的饲料后，会引发多种毒性反应，其中肝脏作为ZEA的主要代谢和转化器官，极易受到损伤。ZEA易诱导肝脏氧化应激、炎症相关因子水平表达改变、肝细胞凋亡等毒性损伤，严重危害人与动物的健康。多酚作为一类具有强抗氧化、抗菌、抗炎等一系列生物活性的植物化学物质，主要包括类黄酮和非类黄酮两大类，笔者选取类黄酮类芦丁（rutin，RUT）和非类黄酮类姜黄素（curcumin，CUR）为代表性化合物阐述多酚缓解ZEA诱导的动物肝脏毒性机制。RUT、CUR均可通过多靶点协同作用对抗ZEA的肝脏毒性，主要作用途径有抗氧化应激、抗炎及抗凋亡作用。笔者主要综述了ZEA对动物肝脏的毒性作用及RUT、CUR缓解ZEA诱导的动物肝脏毒性的作用机制，以期为后续多酚缓解动物ZEA肝脏毒性、促进畜牧业健康发展提供一定的理论依据。

热应激（heat stress，HS）能诱发动物机体发生复杂的病理反应，严重威胁动物健康，甚至导致死亡，造成重大经济损失。血管内皮细胞（vascular endothelial cells，VECs）作为热应激过程中的关键靶点，其损伤机制可分为直接损伤与间接损伤。直接损伤主要包括破坏细胞膜与细胞骨架结构、损伤DNA及诱导凋亡相关基因表达，从而导致VECs结构与功能异常并引发过度凋亡。间接损伤则通过诱发全身性炎症反应、氧化应激及血管张力失调等病理过程介导细胞损伤。而受损的VECs还可释放多种细胞因子，进一步加剧热应激对机体造成的负面影响。中药（traditional Chinese medicine，TCM）凭借来源丰富、成分多样、功能靶向性强和应用安全等多种优势，已成为抗热应激兽药的研究热点。中药活性成分萜类（如芍药苷、人参皂苷Rg1等）、酚类（如阿魏酸、白藜芦醇等）、黄酮类（如槲皮素、葛根素等）等单体成分，以及参附注射液、银杏叶提取物等复方提取物，可通过多通路协同发挥作用。其机制包括激活Kelch样ECH关联蛋白1/核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1（kelch-like ECH-associated protein 1/heme oxygenase-1/nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Keap1/Nrf2/HO-1）通路，上调抗氧化酶活性，从而减轻氧化应激；抑制磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B，PI3K/Akt）、Toll样受体2/核因子-κB（Toll-like receptor 2/nuclear factor kappa-B， TLR2/NF-κB）、TLR4/NF-κB等通路，减少炎症因子与黏附因子的释放；调节B细胞淋巴瘤-2/Bcl-2关联X蛋白（B-cell lymphoma-2/Bcl-2-associated X protein，Bcl-2/Bax）比值、抑制半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）家族活化及保护线粒体功能以抑制凋亡；并通过促进热休克蛋白（heat shock proteins，HSPs）的表达，增强细胞耐热性，从而缓解热损伤。笔者对热应激导致VECs损伤的几种主要机制进行综述，系统总结了中药单体成分及中药提取物抗VECs热应激损伤研究现状，以期为未来中药活性成分抗VECs热应激损伤的深入研究及其在畜禽养殖中的应用提供理论参考。

动物生殖系统疾病导致的睾丸、卵巢氧化损伤及细胞过度凋亡与信号通路失调密切相关，其中铁代谢在动物生殖疾病中发挥着至关重要的作用。铁死亡作为一种铁依赖的脂质过氧化驱动的调控性细胞死亡方式，其核心特征体现为细胞内铁稳态失衡、脂质过氧化物蓄积及谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）介导的抗氧化系统功能缺陷，主要通过SystemXc^--GSH-GPX4轴、铁代谢通路（转铁蛋白受体1、铁蛋白重链等调控）及脂代谢通路（长链酰基辅酶A合成酶家族成员4等介导）协同调控。在动物生殖领域，铁死亡对哺乳动物（人、啮齿类、家兔等）、家禽的生殖机能具有显著影响：在雄性动物中可诱导睾丸氧化应激、生精细胞损伤及精子质量下降；在雌性动物中则与卵巢功能减退、卵泡闭锁、卵母细胞成熟障碍及胚胎发育异常密切相关。环境污染物（如PM2.5、微塑料）、毒素（如镉、玉米赤霉烯酮）及病理因素可通过激活铁死亡通路加剧生殖损伤，而铁死亡抑制剂（Ferrostatin-1）、铁螯合剂及天然产物（褪黑素、枸杞多糖等）可通过调控Nrf2/GPX4等信号通路缓解相关损伤。本综述系统梳理了铁死亡的分子调控机制，全面总结了其在不同类别动物生殖系统中的作用及相关研究进展，深入分析了铁死亡机制及缓解途径，以期为解析动物生殖疾病病理机制、改善繁殖性能提供全新靶点，为畜牧业生殖障碍的防控策略研发奠定理论基础。

自噬是真核细胞内一种高度保守的自我降解过程，通过清除受损细胞器、异常蛋白质及入侵的病原体来维持细胞内稳态，并在应激条件下为细胞提供能量和物质支持，实现细胞内物质的循环利用与更新。自噬相关蛋白（autophagy-related proteins， ATGs）是这一过程的核心执行者。ATG5作为自噬过程中的核心蛋白，通过2个泛素样结构域（UblA和UblB）和1个富含螺旋的结构域与ATG12、ATG16L1等蛋白相互作用形成复合物，驱动自噬体的形成与延伸。在自噬过程中，ATG5通过促进LC3脂化介导自噬体膜延伸。ATG5的翻译后修饰（如磷酸化、泛素化和SUMO化）进一步精细调控其功能，影响自噬体的成熟和细胞定位。ATG5不仅参与自噬调控，还在细胞凋亡、炎症反应、DNA损伤修复及代谢调控等非自噬途径中发挥重要作用。此外，ATG5的异常表达或功能失调与肿瘤、神经退行性疾病、自身免疫性疾病和代谢性疾病等多种疾病密切相关。笔者系统综述了ATG5的结构特征、生物学功能及其在疾病中的作用机制，旨在为相关疾病的治疗提供借鉴和参考。

反10，顺12共轭亚油酸（t10，c12-CLA）是共轭亚油酸（CLA）同分异构体的一种，具有多种生物学功能，如抗肥胖、抗炎、抗糖尿病等。t10，c12-CLA的生物学功能及其信号通路在多个不同的领域均展现出广泛的应用前景与重要价值，但t10，c12-CLA的作用机制仍未完全阐明。笔者重点回顾了t10，c12-CLA在畜禽中的研究成果，重点聚焦于其对卵母细胞发育、乳腺上皮细胞功能、肌肉生长、乳脂含量调控、脂肪代谢调控、免疫功能、脂质调控等方面的影响，并进一步探讨了t10，c12-CLA的分子作用机制，旨为畜禽领域相关问题的深入探索提供参考依据，并推动畜牧业的发展。

美洛昔康是一种高选择性环氧合酶-2抑制剂，属于临床常用非甾体抗炎药。其通过有效抑制前列腺素合成，进而发挥显著的抗炎镇痛作用；同时，美洛昔康对环氧合酶-1抑制活性较弱，能显著降低胃肠道及肾脏不良反应风险，使其成为犬猫临床治疗中安全、高效的关键抗炎镇痛药。近年来，随着宠物医疗需求的不断增长，美洛昔康的临床应用价值持续提升。笔者概述了美洛昔康的理化性质与作用机制，系统比较了目前临床常用剂型的优缺点，并进一步探讨了口服半固体制剂及微针贴片等新剂型在提升给药便利性和动物依从性上的潜力。重点评析了美洛昔康在犬猫关节疾病、肿瘤辅助治疗、胰腺炎肠道保护及围手术期镇痛等领域应用的研究进展，分析了当前临床应用所面临的挑战及未来研究方向。以期为美洛昔康在宠物犬猫临床治疗中的安全、合理及高效用药提供科学参考，同时为其创新研发与转化研究提供新思路。

驼乳脂肪以脂肪球的形式存在，乳脂肪球膜（milk fat globule membrane， MFGM）是包裹在脂肪球外部的三层膜结构。这种具有生物活性功能的三层膜主要由蛋白质、酶、三酰基甘油和极性脂类（胆固醇、鞘脂等）组成。MFGM蛋白因其优异的生物活性功能和营养价值而受到广泛关注。笔者重点综述了驼乳MFGM蛋白的组成分布与核心功能特性，包括其抗菌、免疫调节、乳化稳定及肿瘤干预等作用；从蛋白质组学方面简述了驼乳与牛乳、羊乳等其他乳源的主要MFGM蛋白的组成及功能特性的差异；分析了不同加工工艺对驼乳MFGM蛋白的影响。深入解析驼乳MFGM蛋白的功能特性与差异机制，不仅有助于揭示驼乳的营养价值，且能为驼乳MFGM蛋白产品的开发提供理论基础。

目的 探究饲粮中添加槲皮万寿菊素（quercetagetin， QG）对母兔繁殖性能及其仔兔生长性能的影响，明确QG的适宜添加量，并进一步探究QG的适宜添加妊娠阶段。 方法 试验一选取460只体重和胎次（2~3胎）相近的伊拉母兔，随机分为5组，对照组饲喂基础饲粮，QG100、QG200、QG400、QG600组分别在基础饲粮的基础上添加100、200、400、600 mg/kg QG。试验自母兔配种前6 d至分娩后35 d（仔兔断奶）结束。试验二选取276只体重和胎次相近的伊拉母兔，随机分为3组，包括对照组（基础饲粮）、妊娠前期组（妊娠0~12 d）及妊娠中后期组（妊娠13~30 d），其中妊娠前期组和妊娠中后期组在母兔基础饲粮中添加试验一筛选出的适宜添加剂量的QG。试验记录并分析受胎率、分娩率、窝产仔数、窝产活仔数、死胎数、初生总窝重、初生活仔窝重以及7、14、21和35日龄仔兔数和窝重。 结果 试验一的结果表明，与对照组相比，饲粮添加QG显著提高妊娠母兔的平均日采食量（P<0.05）；QG200和QG400组母兔窝产仔数、综合产活仔数、产活仔数、初生总窝重、初生活仔窝重、7、14、21 d窝仔兔数和7 d仔兔窝重均显著提高（P<0.05）；QG600组母兔受胎率和窝产活仔数也显著提高（P<0.05）。试验二的结果表明，与对照组相比，妊娠中后期组母兔综合窝产仔数、综合产活仔数、初生总窝重、初生活仔窝重、7 d仔兔窝重和仔兔均重以及14 d仔兔窝重均显著提高（P<0.05）；妊娠前期组的7 d仔兔窝重和仔兔均重也显著提高（P<0.05）。 结论 饲粮中添加400 mg/kg QG能显著改善母兔的繁殖性能及其仔兔的生长性能，且在妊娠中后期母兔饲粮中添加效果最佳。

目的 基于蛋白质组学技术系统分析华西牛和平凉红牛牛肉中蛋白质组成以及游离氨基酸差异，旨在揭示牛肉中蛋白质组成与肉品质之间的关系。 方法 采用液相色谱-质谱技术对华西牛和平凉红牛牛肉中的蛋白质和游离氨基酸进行分离鉴定，通过主成分分析（PCA）、差异表达蛋白筛选及功能富集分析，解析不同品种牛肉中蛋白质组成特征，分析两者游离氨基酸含量差异。 结果 华西牛与平凉红牛肉质性状存在明显差异。华西牛与平凉红牛牛肉中共筛选出190个差异表达蛋白，其中华西牛肉中MYBPC2、MYL1和MYL11等蛋白相对丰度高于平凉红牛，而平凉红牛肉中MYH3、MYOZ2和PDLIM3等蛋白相对丰度高于华西牛。差异表达蛋白主要分布在线粒体、核糖体和丝状肌动蛋白等能量产生区域，参与肌肉收缩、肌动蛋白细胞骨架组织结构、呼吸链复合物Ⅰ组装等生物过程，具有肌动蛋白结合、核苷酸结合、醛脱氢酶活性和肌肉α-肌动蛋白结合等分子功能，与肉品质形成密切相关。华西牛与平凉红牛肉中甘氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、酪氨酸、牛磺酸和色氨酸等多种游离氨基酸含量均存在显著差异（P<0.05）。 结论 肉中的肌细胞骨架蛋白、线粒体功能蛋白、代谢酶和游离氨基酸含量的差异是影响华西牛与平凉红牛肉品质的重要因素。

目的 探讨腹腔注射脂多糖（LPS）诱导麻黄鸡炎症模型的最佳剂量。 方法 选取120只1日龄（39.11 g±3.13 g）雄性麻黄鸡，随机分为4组，每组6个重复，每个重复5只鸡，试验期21 d。对照组（CON）麻黄鸡在15、17、19和21日龄时腹腔注射生理盐水，试验组（LL、LM和LH）分别腹腔注射0.25、0.5和1 mg/kg LPS。于15和21 d进行采血并屠宰，计算生长性能指标和免疫器官指数，观察空肠形态，测定血清生化指标、皮质酮含量、炎症因子水平、抗氧化指标及相关基因表达量。 结果 15 d时，与CON组相比，各LPS处理组麻黄鸡终末体重和平均日增重均无显著变化（P>0.05）；LH组麻黄鸡空肠绒毛高度（VH）和绒隐比（V/C）均显著下降（P<0.05）；LM和LH组麻黄鸡空肠闭锁蛋白（Occludin）和核因子-κB（NF-κB）表达均显著下调（P<0.05）；LH组麻黄鸡血清皮质酮含量显著升高（P<0.05）；LL、LM和LH组麻黄鸡血清甘油三酯（TG）含量均显著降低（P<0.05）；LH组麻黄鸡血清细胞炎症因子白细胞介素-6（IL-6）含量显著升高（P<0.05）；LH组麻黄鸡血清总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性显著降低（P<0.05），丙二醛（MDA）含量显著升高（P<0.05）。21 d时，与CON组相比，LM和LH组麻黄鸡脾脏指数和胸腺指数均有所升高（P>0.05）；LH组麻黄鸡空肠隐窝深度（CD）极显著升高（P<0.01），V/C显著降低（P<0.05）；LH组麻黄鸡空肠闭合蛋白1（Claudin-1）表达极显著下调（P<0.01），IL-1β、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和NF-κB表达均极显著上调（P<0.01）；各LPS组T-SOD活性均显著降低（P<0.05）。 结论 LPS注射可显著影响麻黄鸡免疫器官发育、肠道形态、炎症因子表达及抗氧化功能，成功诱导炎症应激。综合各项指标，1.0 mg/kg LPS为构建麻黄鸡炎症模型的最佳剂量。

目的 基于转录组测序探究高精料饲粮中添加苦豆子总碱对绵羊肝损伤的缓解机制及其对糖代谢关键通路的调控作用。 方法 选用18只3月龄杜蒙公羊随机分为G1组（精粗比50∶50）、G2组（精粗比70∶30）和S3组（精粗比70∶30，添加121 mg/kg苦豆子总碱），每组6只羊。预饲期15 d，试验期60 d，试验结束后每组随机选取3只羊屠宰，采集肝脏组织进行转录组测序，筛选差异表达基因（DEGs），并进行GO功能和KEGG通路富集分析；分析糖代谢基因表达量倍数变化，评估关键酶基因的表达差异，并从中选取4个基因通过实时荧光定量PCR检测进行验证。 结果 G2 vs G1组中共筛选到411个DEGs（上调233，下调178），S3 vs G2组中共筛选到3 664个DEGs（上调1 799，下调1 865）。GO功能富集分析显示，G2 vs G1组的DEGs主要富集于细胞外基质和炎症免疫反应等条目；而S3 vs G2组的DEGs则主要富集于免疫系统调控及生物过程正调控相关条目。KEGG通路富集分析表明，G2 vs G1组中未显著富集到糖代谢相关通路；而S3 vs G2组的DEGs显著富集到6条与糖代谢相关通路，包括糖酵解/糖异生、丙酮酸代谢、果糖和甘露糖代谢、抗坏血酸和醛酸代谢、戊糖和葡萄糖醛酸的相互转化和肌醇磷酸盐代谢；其中糖异生通路中PCK1、PCK2、PC、G6PC1和FBP1基因表达量显著上调（P<0.05）；糖酵解通路中HK1、HK2、HK3和PFKP基因表达量显著下调，PKLR基因表达量显著上调（P<0.05）；柠檬酸循环通路中MDH2基因表达量显著上调（P<0.05）。PCK1、G6PC1、IDH3B、SDHC基因的实时荧光定量PCR验证结果与转录组测序结果一致。 结论 苦豆子总碱通过富集免疫系统调控及生物过程正调控相关功能，可减轻高精料诱导的绵羊肝脏炎症与纤维化；通过提高糖异生关键酶基因的表达，抑制糖酵解上游酶基因的表达，同时促进其下游酶基因的表达，并促进肝脏柠檬酸循环，进而改善高精料导致的糖代谢紊乱，维持机体糖代谢稳态。

目的 研究植物乳杆菌硒对蛋鸡卵巢、输卵管组织结构及抗氧化功能和炎症指标的影响，以期为蛋鸡生殖健康提供新的硒源参考。 方法 试验选取96只22周龄健康海兰褐蛋鸡，随机分为2个处理组（每组16个重复，每个重复3只鸡）：对照组（CON）蛋鸡饲喂常规玉米-豆粕型基础饲粮，饲粮中硒实测含量为0.38 mg/kg；植物乳杆菌硒组（SEL）在基础饲粮基础上添加500 mg/kg植物乳杆菌硒，饲粮中硒实测含量为1.58 mg/kg。试验共188 d。试验结束后每组随机挑选8只蛋鸡屠宰，采集输卵管和卵巢组织样本，分析植物乳杆菌硒对蛋鸡生产性能的影响；通过HE染色观察卵巢和输卵管的组织结构，并进一步检测植物乳杆菌硒对蛋鸡卵巢激素水平的影响；通过实时荧光定量PCR检测卵巢和输卵管组织中抗氧化与炎症相关基因的相对表达量。 结果 ①两组蛋鸡日采食量、产蛋率、平均日产蛋重、料蛋比等主要生产性能指标均无显著差异（P>0.05）。②与CON组相比，SEL组蛋鸡卵巢组织形态更为完整，大黄卵泡数量显著增加（P<0.05），且卵巢组织中促卵泡激素（FSH）、雌二醇（E₂）水平均显著升高（P<0.05）。③与CON组相比，SEL蛋鸡输卵管膨大部的组织结构和形态更完整，输卵管膨大部组织中抗氧化相关基因GPX1、GPX4、CAT、TXNRD2、TXNRD3和SOD1，以及炎症因子相关基因IL-6和TNFAIP3表达量均显著升高（P<0.05）。 结论 饲粮中添加植物乳杆菌硒可有效改善产蛋鸡卵巢及输卵管组织的形态结构，提升输卵管组织的抗氧化功能。本试验结果表明植物乳杆菌硒对提升蛋鸡输卵管健康、提高蛋鸡综合生产效益具有重要应用价值。

目的 比较不同饲料效率肉鸭生长性能、屠宰性能和血浆生化指标差异，并分析各指标之间的相关性。 方法 选用体重相近、健康的1日龄高、低饲料效率的雄性北京鸭各75只，分别为高饲料效率组（HFE）和低饲料效率组（LFE），每组5个重复，每个重复15只鸭。试验鸭饲喂相同商品饲粮，试验周期为35 d。于试验鸭14、35日龄，对每笼鸭体重和剩余饲粮称重，计算各阶段平均体重、平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G），统计剩余采食量（RFI）；于35日龄颈静脉采血后屠宰，统计胸肌率、腿肌率、肝脏指数、腹脂率、皮脂率和全净膛率，并测定血浆生化指标，进一步分析各指标间的相关性。 结果 ①HFE组肉鸭14、35日龄体重和1~14、15~35和1~35日龄ADG均显著高于LFE组（P<0.05），1~14、15~35和1~35日龄F/G和RFI均显著低于LFE组（P<0.05）。②HFE组肉鸭胸肌率和腿肌率显著高于LFE组（P<0.05），腹脂率、皮脂率显著低于LFE组（P<0.05）。③与LFE组相比，HFE组肉鸭血浆中甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、尿酸（UA）、直接胆红素（DBIL）含量和谷草转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）活性显著降低（P<0.05），γ-谷氨酰转肽酶（GGT）活性显著升高（P<0.05）。④肉鸭F/G与ADG、胸肌率呈显著负相关（P<0.05），与皮脂率、RFI、肝脏指数和血浆HDL、LDL含量呈显著正相关（P<0.05）。 结论 高饲料效率肉鸭日增重、胸肌率和腿肌率较高，具有更强的蛋白质沉积能力；低饲料效率肉鸭皮脂率和腹脂率较高，具有更强的脂肪沉积能力。

目的 探究蛋鸡饲料中添加1%不同来源油脂（豆油、椰子油、棕榈油、亚麻油）对蛋鸡产蛋性能和蛋品质的影响，为蛋鸡饲粮中合理选用油脂提供科学依据。 方法 选取700只产蛋率和体重相近的32周龄海兰褐蛋鸡，随机分为5组，每组5个重复，每个重复28只蛋鸡。对照组提供基础饲粮，试验组分别在基础饲粮中添加1%豆油、椰子油、棕榈油和亚麻油，试验期为28 d。试验期间统计产蛋性能，并在第28天从每个重复中随机挑取5个鸡蛋进行蛋品质分析，利用气相色谱仪分析蛋黄脂肪酸组成。 结果 与对照组相比，饲粮中添加1%豆油、棕榈油、亚麻油和椰子油显著降低了蛋鸡的平均日采食量、破蛋率和料蛋比（P<0.05）；椰子油组蛋鸡产蛋率、平均蛋重和蛋壳强度显著提高（P<0.05）。鸡蛋脂肪酸分析结果显示，添加1%豆油显著提高了鸡蛋中亚油酸含量（P<0.05），ω-6多不饱和脂肪酸（ω-6PUFA）含量分别比对照组、棕榈油组、亚麻油组、椰子油组提高了37.41%、36.42%、30.00%和37.98%（P<0.05）；添加1%亚麻油显著提高了鸡蛋中亚麻酸、二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA）含量（P<0.05），ω-3多不饱和脂肪酸（ω-3PUFA）含量分别比对照组、豆油组、棕榈油组、椰子油组提高了77.82%、63.53%、73.31%和73.68%；此外，饲粮中添加1%豆油和亚麻油显著提高了鸡蛋中不饱和脂肪酸（UFA）的含量（P<0.05）。 结论 添加1%不同种类植物油可有效改善蛋鸡生产性能：椰子油是提升产蛋性能的最佳选择，豆油和亚麻油分别是鸡蛋ω-6和ω-3 PUFA强化的理想来源，棕榈油则是安全的经济型选择。

目的 解析新疆喀什地区多浪羊和湖羊在瘤胃微生物组成、功能及肝脏基因表达上的差异，揭示二者对环境适应性的机制。 方法 运用宏基因组技术分析2个品种羊瘤胃微生物的分类学组成差异及功能富集情况，通过转录组技术检测肝脏组织差异表达基因，进行GO功能、KEGG通路富集及蛋白质互作（PPI）网络分析，并联合两者结果，探寻羊瘤胃微生物与肝脏基因的关联。 结果 宏基因组分析结果显示，多浪羊基因多样性较湖羊更丰富。在瘤胃微生物分类学层面，2个品种绵羊的优势菌门均为拟杆菌门和厚壁菌门，但种水平上多浪羊的Clostridiales bacterium丰度更高。功能注释结果表明，瘤胃微生物主要富集于碳水化合物、氨基酸等代谢途径，其中，在多浪羊中主要富集于氨基酸和脂肪酸代谢通路；在湖羊中主要富集于繁殖相关通路。转录组分析结果显示，在多浪羊和湖羊肝脏组织中共检测到498个差异表达基因（上调191个、下调307个），包括ADIPOQ（调控脂肪代谢）、ATP2A1（调节钙信号和应激反应）及MX1（抗病原体）等关键基因。GO功能富集分析显示，差异表达基因主要参与肌肉系统过程、葡萄糖输入等生物过程；KEGG通路富集揭示，差异表达基因显著富集于肌肉细胞骨架、AMPK信号通路等8条信号通路。PPI网络分析显示，ATP2A1作为枢纽基因，与多种蛋白存在相互作用。联合分析表明，瘤胃中Clostridiales bacterium与肝脏中MX1基因存在显著线性关联（P<0.05），可能通过宿主-微生物互作调控代谢及免疫通路。 结论 多浪羊和湖羊在瘤胃微生物组成、功能及肝脏基因表达上存在显著差异，这些差异以及瘤胃微生物与肝脏基因之间的关联，共同构成了它们对环境适应性的机制。

目的 探究饲粮中添加石榴皮粉（PPP）对白羽肉鸡生长性能、肠道形态、血清生化与抗氧化指标及盲肠菌群结构的影响。 方法 选取288只1日龄爱拔益加（AA）肉鸡，随机分为4组，每组3个重复，每重复24只鸡。对照组（CON）饲喂基础饲粮，1、2和3组分别在基础饲粮中添加0.75%、1.5%和3.0%的PPP，试验期42 d。于试验开始和结束时称重，记录采食量，计算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。试验结束后，每组随机选取12只鸡，采集血液并分离血清、收集空肠和回肠组织及盲肠内容物，测定血清生化、抗氧化指标，观察肠道形态结构，并利用16S rDNA测序分析盲肠微生物组成。 结果 与对照组相比，1组肉鸡生长性能有改善趋势，但差异不显著（P>0.05）。与对照组相比，1组肉鸡血清天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性显著降低（P<0.05），超氧化物歧化酶（SOD）活性和总抗氧化能力（T-AOC）显著提高（P<0.05）。与对照组相比，1组肉鸡空肠绒毛高度（VH）及绒隐比（V/C）显著上升（P<0.05）。盲肠微生物测序结果显示，0.75% PPP可显著提升菌群丰富度与多样性，促进拟杆菌属（Bacteroides）、双歧杆菌属（Bifidobacterium）和克里斯滕森氏菌属（Christensenella）等有益菌的增殖（P<0.05），显著降低潜在致病菌另枝菌属（Alistipes）丰度（P<0.05）。相关性分析表明，拟杆菌属和双歧杆菌属与血清抗氧化指标和肠道形态参数均呈正相关。 结论 本试验条件下，饲粮中添加0.75% PPP能够显著增强肉鸡机体的抗氧化能力、改善肠道黏膜形态结构，并提高盲肠有益菌群的物种丰富度。

目的 旨在探索全年季节性差异化饲养对牦牛生产性能、血清生化及养殖效益的影响。 方法 试验选取50头体况良好、体重相近（147.49 kg±19.72 kg）的公牦牛，随机分为对照组（CON）和试验组（SF），每组25个重复，每个重复1头牦牛。对照组牦牛全年于天然牧场进行放牧；试验组根据季节性差异采用不同饲养模式：暖季补饲（4~10月）实施“划区轮牧放牧+补饲”，冷季补饲（10月~翌年1月）采用“划区轮牧放牧+补饲”，冷季舍饲（翌年1~4月）采用“暖棚+舍饲”饲养，试验期为365 d。试验期间，分别于4、10月及翌年1、4月测定牦牛生产性能，并于10月和翌年4月采集血清样本进行血清生化分析，最后进行养殖效益分析。 结果 试验组牦牛在4~10月、10月~翌年1月、翌年1~4月日增重均显著高于对照组（P<0.05），并且全年平均日增重由对照组的115.56 g显著提高至试验组的430.63 g（P<0.05）。血清生化指标检测显示，10月试验组牦牛血清白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、总蛋白（TP）水平显著高于对照组（P<0.05）；翌年4月试验组牦牛血清葡萄糖（GLU）、ALB、TP浓度显著高于对照组（P<0.05）。试验组10月血清ALB和TP浓度显著高于翌年4月（P<0.05）。脂肪代谢物方面，10月试验组牦牛血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、极低密度脂蛋白（VLDL）浓度显著高于对照组（P<0.05），翌年4月试验组牦牛血清低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、VLDL、非酯化脂肪酸（NEFA）、β-羟基丁酸（BHBA）浓度均显著低于对照组（P<0.05）。对照组10月牦牛血清VLDL、NEFA和BHBA浓度显著低于翌年4月（P<0.05）；同时，试验组呈现类似趋势，10月牦牛血清VLDL、NEFA和BHBA浓度亦显著低于翌年4月（P<0.05）。能量代谢相关激素中，10月试验组牦牛血清胰岛素（INS）浓度显著高于对照组（P<0.05）；翌年4月试验组牦牛血清胰高血糖素（GLN）浓度显著低于对照组（P<0.05）。对照组10月牦牛血清脂联素（APN）、GLN浓度显著低于翌年4月（P<0.05），INS浓度则以10月显著高于翌年4月（P<0.05）；试验组10月GLN浓度显著低于翌年4月，INS浓度则以10月显著高于翌年4月（P<0.05）。10月试验组牦牛血清生长激素（GH）、胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）浓度显著高于对照组（P<0.05）；翌年4月试验组GH、IGF-Ⅰ浓度呈类似规律，仍显著高于对照组（P<0.05）。试验组内10月血清IGF-Ⅰ浓度显著高于翌年4月同组水平（P<0.05）。养殖效益分析显示，试验组每头牦牛养殖利润较对照组增加884.14元。 结论 与传统放牧模式相比，全年季节性差异化饲养在放牧采食基础上补充牦牛养分摄入显著提高了牦牛暖季增重性能，提升了血清糖、氮等营养代谢物水平，减少冷季脂肪分解动员与掉膘失重，并促进了生长激素分泌，最终实现了牦牛养殖经济效益的提升。

目的 探究饲粮中添加盐地碱蓬提取物（SSE）对湖羊瘤胃发酵参数及胃肠道微生物群落结构的影响。 方法 选取36只体重（30.27±1.18）kg健康湖羊公羔，随机分为对照组（CON）和试验组（SSE），每组6个重复，每个重复3只羊。对照组采用全混合日粮（TMR），试验组在TMR基础上添加0.6% SSE。预饲期15 d，正试期30 d。于正试期第30天空腹采集湖羊瘤胃液和直肠粪便样本，测定瘤胃发酵参数和瘤胃、直肠粪便微生物。 结果 ①相较于CON组，SSE组湖羊瘤胃总挥发性脂肪酸（TVFA）含量极显著提高（P<0.01），瘤胃pH、乙酸、丙酸、异丁酸、异戊酸和戊酸含量均显著提高（P<0.05）。②两组湖羊瘤胃微生物在门、属水平上的组成及Alpha、Beta多样性指数均无显著差异（P>0.05），SSE组肠滴虫属的相对丰度显著高于CON组（P<0.05）。瘤胃微生物与瘤胃发酵参数的相关性分析显示，黏螺菌属的相对丰度与瘤胃丁酸浓度呈显著正相关（P<0.05），解琥珀酸菌属的相对丰度与瘤胃丁酸含量呈显著负相关（P<0.05）。③两组湖羊直肠粪便微生物在门水平上的组成及Alpha、Beta多样性指数均无显著差异（P>0.05）；与CON组相比，SSE组湖羊直肠中普雷沃菌属、阿加托杆菌属、丁酸弧菌属A、尤杆菌属J和甲基杆菌属的相对丰度均显著提高（P<0.05）。 结论 饲粮中添加0.6% SSE可优化湖羊瘤胃发酵参数，改善瘤胃微生物群落结构与组成，提高肠道中阿加托杆菌属、丁酸弧菌属和尤杆菌属等有益菌的相对丰度。

目的 研究不同饲喂方式下添加膳食纤维（DF）对黄羽肉鸡屠宰性能、胫骨发育、粪便微生物及耐药基因的影响。 方法 选取1日龄健康、体重接近（35 g±5 g）的雄性黄羽肉鸡250只，随机分为5组，每组5个重复，每重复10只鸡。对照组（CON）饲喂不添加DF的基础饲粮（FF）；试验1组（T1）饲喂低纤维饲粮（LF，含1.5% DF）；试验2组（T2）饲喂高纤维饲粮（HF，含3% DF）；试验3组（T3）在0~4周龄饲喂FF，5~8周龄饲喂LF；试验4组（T4）在0~4周龄饲喂LF，5~8周龄饲喂HF。试验期为56 d。试验结束时翅静脉采血测定血钙、血磷；屠宰后测定屠宰性能、胫骨性能指标及胫骨灰分、钙、磷含量；采集CON与T2组新鲜粪便进行宏基因组学分析。 结果 ①屠宰性能：各试验组黄羽肉鸡的屠宰率、半净膛率、全净膛率、胸肌率及腿肌率均无显著差异（P>0.05）。②胫骨指标：各组黄羽肉鸡胫骨长、胫骨重、髓腔直径、体积、密度等均无显著变化（P>0.05）；与T1组相比，T2和T3组黄羽肉鸡胫骨直径显著提高（P<0.05）；与T3和T4组相比，T2组黄羽肉鸡的皮质骨厚度显著增加（P<0.05）；与CON组相比，各试验组黄羽肉鸡的胫骨灰分、骨钙和磷含量均无显著差异（P>0.05）。③血清钙、磷含量显示，与CON组相比，T1、T3和T4组黄羽肉鸡的血钙含量显著增加（P<0.05），T1、T2、T3和T4组的黄羽肉鸡的血磷含量显著降低（P<0.05）；④宏基因组测序表明，与CON组相比，T2组黄羽肉鸡粪便微生物中副拟杆菌属、拟杆菌属、梭菌属、粪杆菌属、链球菌属、肠球菌属、棒状杆菌属及罗氏菌属等微生物的相对丰度显著升高（P<0.05），同时T2组粪便中耐药基因poxtA和vatE相对丰度显著降低（P<0.05）。 结论 本试验条件下，全程在饲粮中添加3%的DF可改善黄羽肉鸡胫骨性能与粪便微生物组成，并降低粪便中特定耐药基因的丰度。

目的 探讨甜叶菊提取物、金银花提取物、黄芪提取物、葡萄籽原花青素提取物、甘草提取物和辣椒碱提取物对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠免疫功能的影响，为植物提取物在免疫抑制疾病预防中的应用提供数据支持。 方法 选取64只6周龄SPF级雄性昆明小鼠（体重20 g±2 g），随机分为8组，每组8个重复，每个重复1只，对照组、模型组（环磷酰胺处理）及6种植物提取物处理组，试验期31 d。第1~28天，对照组与模型组小鼠每日灌胃0.2 mL生理盐水，各提取物处理组小鼠分别灌胃给予甜叶菊提取物、金银花提取物、黄芪提取物、葡萄籽原花青素提取物、甘草提取物和辣椒碱提取物溶液（剂量分别为500、180、400、200、250和15 mg/（kg·d））。第29~31天，对照组小鼠腹腔注射生理盐水（0.2 mL/d），环磷酰胺组与各提取物处理组小鼠均注射80 mg/（kg·d）环磷酰胺。于第0、28、32天测定小鼠体重；第32天采集肝脏和脾脏，计算脏器系数并观察组织病理变化；检测血清免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）和细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-10）含量。 结果 ①第32天，环磷酰胺组小鼠终末体重显著低于对照组（P<0.05），而金银花提取物组小鼠终末体重显著高于环磷酰胺组（P<0.05）。②与对照组相比，环磷酰胺组小鼠肝脏指数无显著变化（P>0.05），但肝脏组织出现空泡变性；与环磷酰胺组相比，各植物提取物处理后均能减轻小鼠肝细胞空泡，具有保护效应。③与对照组相比，环磷酰胺组小鼠脾脏指数降低了38.71%，且脾脏组织红白髓界限模糊，脾中央动脉消失；与环磷酰胺组相比，甜叶菊、甘草、辣椒碱和黄芪提取物均能够保护小鼠脾脏的特定组织结构（如红白髓分界清晰），金银花提取物则对小鼠脾脏表现出最优保护作用（维持正常组织结构）。④与对照组相比，环磷酰胺组小鼠血清免疫球蛋白和细胞因子含量均降低（P>0.05）。与环磷酰胺组相比，金银花、黄芪、葡萄籽原花青素提取物组小鼠血清IgA含量和辣椒碱提取物组小鼠血清IgG含量均显著升高（P<0.05）；除甜叶菊提取物外的其余植物提取物组小鼠血清中TNF-α含量和金银花提取物组小鼠血清IL-6、IL-10含量也显著升高（P<0.05）。 结论 在本试验条件下，各植物提取物均对环磷酰胺诱导的免疫抑制具有一定预防作用，其中金银花提取物效果最优，黄芪、葡萄籽原花青素、辣椒碱、甘草和甜叶菊提取物次之，上述提取物在免疫抑制疾病预防中具备潜在应用价值。

目的 探讨稀土壳糖胺螯合盐（RECC）对生长育肥猪生长性能、养分表观消化率、血清指标及粪便微生物的影响。 方法 选取80头健康、体重接近（56.17 kg±0.05 kg）的“长白×荣昌”二元杂交猪，随机分为2组，每组5个重复，每个重复8头猪（公母各半）。对照组饲喂基础饲粮，试验组饲喂基础饲粮＋200 mg/kg RECC。预试期3 d，正试期34 d。于试验开始和结束时空腹称重，记录采食量，并于试验结束当日采集饲料、粪便和血液样本，用于测定生长性能、养分消化率、血清生化、抗氧化指标、激素水平及粪便菌群结构。 结果 与对照组相比，①试验组生长育肥猪的终末体重和平均日增重呈升高趋势，料重比呈降低趋势（0.05≤P<0.10）；②试验组生长育肥猪的粗蛋白质表观消化率极显著提高（P<0.01），总磷表观消化率有升高趋势（0.05≤P<0.10）；③试验组生长育肥猪的血清生化指标均无显著变化（P>0.05），但血清总抗氧化能力（T-AOC）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性显著提高（P<0.05），丙二醛（MDA）含量显著降低（P<0.05）；④试验组生长育肥猪血清胰岛素样生长因子-1（IGF-1）和生长激素（GH）水平极显著提高（P<0.01），四碘甲腺原氨酸（T₄）水平显著提高（P<0.05）；⑤试验组生长育肥猪粪便菌群香侬（Shannon）指数有升高趋势（0.05≤P<0.10），Beta多样性在空间上与对照组明显分离，螺旋体门的相对丰度显著降低（P<0.05）。 结论 在本试验条件下，饲粮中添加200 mg/kg RECC可提高生长育肥猪的养分消化率、血清抗氧化能力及激素水平，改善肠道菌群结构，对促进生长性能具有积极作用。本试验结果为RECC在猪生产中的应用提供理论依据和实践参考。

目的 探讨绿茶浸提液对青脚麻鸡屠宰性能、肉品质以及血清生化指标的影响。 方法 选取400只1日龄、健康且体重相近（40 g±5 g）的青脚麻鸡，随机分成4组，每组5个重复，每个重复20只鸡，公母各半。各组鸡饲喂相同基础饲粮，对照组饮用常温凉开水，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别给予0.3%、0.6%和1.2%绿茶浸提液供其自由摄取，试验期42 d。试验期结束后，从每个重复中随机选取2只鸡，翅静脉采血5 mL用于血清生化指标的检测；屠宰取两侧胸肌、腿肌，分别用于屠宰性能与肉品质测定。 结果 屠宰性能结果显示，与对照组相比，各试验组青脚麻鸡屠宰率、半净膛率均显著升高（P<0.05），试验Ⅰ和Ⅱ组青脚麻鸡全净膛率均显著升高（P<0.05）。肉品质结果显示，与对照组相比，各试验组青脚麻鸡胸肌剪切力均显著降低（P<0.05），试验Ⅱ和Ⅲ组青脚麻鸡胸肌亮度（L^*）值均显著降低（P<0.05），试验Ⅱ组青脚麻鸡的腿肌脂肪含量显著升高（P<0.05），试验Ⅰ组青脚麻鸡的腿肌红度（a^*）值显著升高（P<0.05）。血清生化结果显示，与对照组相比，试验Ⅱ组青脚麻鸡血清总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量均显著升高（P<0.05），血清碱性磷酸酶（ALP）活性显著降低（P<0.05）；试验Ⅰ和Ⅲ组青脚麻鸡血清TP、球蛋白（GLB）含量均显著降低（P<0.05），血清ALB含量显著升高（P<0.05）；试验Ⅲ组青脚麻鸡血清甘油三酯（TG）含量和ALP活性均显著降低（P<0.05）。与试验Ⅰ和Ⅲ组相比，试验Ⅱ组青脚麻鸡血清尿素氮（BUN）含量显著降低（P<0.05）。 结论 饮用绿茶浸提液可提高青脚麻鸡的屠宰性能，改善肉品质，提升腿肌脂肪沉积，并对机体蛋白质和脂类代谢具有调节作用，其中以0.6%浓度的效果最佳。

目的 探讨妊娠中后期添加酵母培养物（YC）对初产母羊生产性能及产后血清生化指标和瘤胃发酵参数的影响。 方法 选取36只妊娠51 d、体重为（37.72±1.91）kg的健康湖羊，按体重相近原则随机分成2组，每组6个重复，每个重复3只羊。试验经9 d预饲，于妊娠60~150 d进行分组饲喂，其中对照组（CK组）提供全混合饲粮；试验组（YC组）在全混合饲粮中添加5%的YC。母羊分娩后，2组均饲喂相同的对照组饲粮。于产后第20天采集母羊血液和瘤胃液样本，测定血清生化、免疫、抗氧化指标及瘤胃发酵参数；同时测定母羊与羔羊的生产性能，以评估YC的持续性效应。 结果 与CK组相比，①YC组羔羊初生重显著升高（P<0.05），羔羊20 d体重也有升高的趋势（0.05<P<0.10）；②YC组母羊血清中皮质醇（COR）含量极显著升高（P<0.01），总蛋白（TP）含量显著升高（P<0.05），白蛋白（ALB）含量有升高的趋势（0.05<P<0.10）；③YC组母羊血清中白细胞介素-2（IL-2）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量极显著升高（P<0.01），免疫球蛋白G（IgG）含量显著升高（P<0.05）；④YC组母羊血清中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性极显著升高（P<0.01），总抗氧化能力（T-AOC）显著升高（P<0.05），超氧化物歧化酶（SOD）活性有升高的趋势（0.05<P<0.10），丙二醛（MDA）含量则呈降低的趋势（0.05<P<0.10）；⑤YC组瘤胃液中微生物蛋白（MCP）含量和丙酸浓度均有升高的趋势（0.05<P<0.10）。 结论 妊娠中后期添加YC可提高初产母羊生产性能，改善母羊机体免疫功能和抗氧化能力。

目的 对华西牛肌肉生长抑制素（myostatin，MSTN）基因进行精准编辑，以提升其产肉性能，同时建立高效的基因编辑技术体系，为中国肉牛生物育种提供理论依据和技术支撑。 方法 利用CRISPR/Cas9系统设计6条靶向MSTN基因外显子1和2的sgRNAs，构建Cas9敲除载体，并通过电转法将其转染至华西牛胎儿成纤维细胞。采用流式荧光分选技术筛选突变单克隆细胞株，并通过Sanger测序验证编辑效果。利用Western blotting检测野生型及编辑后的华西牛胎儿成纤维细胞中MSTN蛋白表达水平，评估基因编辑效率。通过Cas-OFFinder软件预测脱靶位点，并在单克隆细胞株中进行测序验证。此外，以体外受精（IVF）合子为材料，使用不同的电穿孔参数，将Cas9核糖核蛋白（RNP）导入胚胎，检测卵裂率和囊胚率，并通过巢式PCR和测序验证胚胎编辑效果。 结果 试验成功构建6种Cas9敲除载体，转染效率稳定在12.7%~18.6%之间。流式荧光分选获得35株MSTN基因敲除单克隆细胞株，其中E2-3单载体和E2（2+3）双载体编辑效率最高，分别为57.9%和55.6%。Western blotting结果显示，编辑组MSTN蛋白表达量与野生型相比极显著降低（P<0.01）；脱靶检测未发现明显脱靶效应，验证了编辑系统的高特异性。在胚胎编辑试验中，优化后的电穿孔参数（25 V、6个脉冲、2.5 ms）使囊胚率达到18.7%，显著高于其他参数处理组（P<0.05）。巢式PCR和测序分析证实，编辑后的囊胚在外显子1和2中分别发生单碱基突变和多碱基突变。 结论 试验成功建立了华西牛MSTN基因编辑技术体系，实现了高效的基因敲除和胚胎编辑，为华西牛的遗传改良提供了可靠的技术方案。优化的电穿孔参数和双载体策略提升了编辑效率，且未检测到脱靶效应，为肉牛生物育种的进一步发展奠定了重要基础。

目的 探究乌蒙乌骨鸡酪氨酸酶（tyrosinase，TYR）基因在进化过程中形成的密码子使用模式特征及影响因素，解析不同物种间亲缘进化与密码子使用偏好性的关系，为开展乌骨鸡TYR基因异源高效遗传转化提供借鉴与参考。 方法 以乌蒙乌骨鸡与其他22个物种的TYR基因CDS为材料，采用CodonW 1.4.4、CUSP、CHIPS、EMBOSS等软件分析该基因密码子使用偏好模式特征；通过中性绘图（Neutrality-plot）和奇偶偏好性（PR2-plot）方法分析造成密码子使用偏好性的可能因素；基于同义密码子相对使用度（relative synonymous codon usage，RSCU）值构建不同物种TYR基因密码子使用偏好性聚类热图，利用ClustalX 1.83和Mega 7.0软件对不同物种TYR基因CDS进行系统进化分析；分别比较乌蒙乌骨鸡TYR基因与小鼠、斑马鱼和大肠杆菌3种模式生物基因组密码子的使用频率。 结果 乌蒙乌骨鸡TYR基因偏好使用的密码子有27个（RSCU>1.0），其中ATC、CTG、AGA、TCT、TCA和ACT为优势密码子（RSCU>1.6），GC_3s、GC、ENC和CBI值分别为50.38%、47.30%、54.57和0.025，偏好性较弱；鲤科鱼类GC_3s和GC含量均高于55%，第3位碱基偏好使用G/C。Neutrality-plot和PR2-plot分析显示，自然选择压力是不同物种TYR基因密码子使用偏好模式特征形成的主要因素。RSCU值聚类热图与CDS系统进化结果不完全一致，2种聚类方法均显示乌蒙乌骨鸡、原鸡和日本鹌鹑等鸡形目TYR基因CDS密码子使用具有相似的偏好性。与小鼠和大肠杆菌相比，斑马鱼更适宜作为乌蒙乌骨鸡TYR基因异源表达系统。 结论 不同物种间TYR基因密码子使用偏好模式特征存在差异，自然选择是其偏好性形成的主要影响因素，模式生物斑马鱼可作为乌蒙乌骨鸡TYR基因功能解析的遗传转化受体。

目的 早发性肌无力综合征（early onset muscle weakness syndrome，MW）是新近发现的一种荷斯坦牛遗传缺陷，患病犊牛表现为出生后趴卧不起、后肢肌肉萎缩等，其遗传机制与L型钙通道蛋白α1S亚基编码基因CACNA1S的单碱基突变相关。本研究旨在建立该遗传缺陷的分子检测方法，并探究其在国内荷斯坦牛群体中的扩散情况。 方法 基于MW致病位点特异性DNA序列，设计扩增阻滞突变系统-聚合酶链式反应（ARMS-PCR）检测引物，对317份荷斯坦牛冻精和毛囊样本进行MW遗传缺陷基因筛查，通过Sanger测序对ARMS-PCR检测结果进行验证，并利用系谱数据追溯MW突变源头。 结果 ARMS-PCR检出MW携带者21头，携带率为6.62%（21/317），未发现缺陷基因纯合子，提示该突变为隐性纯合致死。Sanger测序与ARMS-PCR所得基因型完全一致，证明该技术具有高度准确性。系谱追溯表明，MW携带者的遗传来源可追溯至1984年出生的荷斯坦公牛Southwind Bell of Bar-Lee。 结论 MW遗传缺陷已在中国荷斯坦牛群体中扩散且携带率较高，建议牧场应尽早开展MW遗传缺陷基因检测和风险评估，采取科学的选种选配措施以减少遗传缺陷导致的经济损失。

目的 探究磷酸三酯酶相关基因（phosphotriesterase related gene，PTER）和钙结合蛋白2（calbindin 2，CALB2）基因多态性与美系大白猪生长性状之间的相关性，为美系大白猪的生长性状分子育种提供新的标记资源。 方法 选取385头达100 kg体重的美系大白猪，测定其背膘厚，采集耳组织样品提取DNA后，根据猪参考基因组（Sscrofa 11.1）序列设计引物，通过PCR产物直接测序鉴定美系大白猪群体PTER和CALB2基因的单核苷酸多态性（SNP）位点，利用POPGENE软件对SNP位点进行遗传多样性分析，并利用SPSS 23.0软件分析其与美系大白猪生长性状的相关性。 结果 多态性检测结果显示，美系大白猪PTER基因g.45384562 G>C位点存在3种基因型：GG、GC和CC，优势等位基因型为GG（0.5403），优势等位基因为G（0.7468）；CALB2基因g.14391325 G>A位点存在3种基因型：GG、GA 和AA，优势等位基因型为GA（0.4545），优势等位基因为A（0.5545）。群体遗传分析结果表明，PTER和CALB2基因2个SNPs位点的多态信息含量（PIC）分别为0.31和0.37，属中度多态性（0.25<PIC<0.5）。关联分析结果显示，PTER基因g.45384562 G>C位点对美系大白猪校正100 kg体重日龄无显著影响（P>0.05），GG基因型个体的校正100 kg活体背膘厚显著高于GC和CC基因型（P<0.05）；CALB2基因g.14391325 G>A位点对美系大白猪校正100 kg体重日龄及校正100 kg活体背膘厚均存在极显著影响（P<0.01）。联合效应分析表明，PTER基因CC基因型与CALB2基因AA基因型的合并基因型CCAA是与缩短校正100 kg体重日龄和降低校正100 kg活体背膘厚相关的较优基因型组合，其对应个体的这2个性状指标均低于其他个体。 结论 本研究在美系大白猪群体中鉴定了PTER和CALB2基因的2个SNPs位点，且与生长性状存在显著关联，这2个位点（尤其CCAA合并基因型）在美系大白猪的遗传改良中具有一定的应用前景。

目的 L-丙氨酸（L-alanine， L-Ala）是一种多功能添加剂，兼具增味剂和pH缓冲调节功能。本试验旨在探究L-Ala对公猪精液常温保存效果的影响，为改善公猪精液稀释液配方提供理论依据。 方法 采集3头1~2岁健康成年杜洛克公猪精液，在Modena稀释液中添加不同浓度（0、20、40、80、160、320 μg/mL）L-Ala，在17 ℃条件下检测第1、3、5和7天的精子活力和精子运动参数（直线运动速率（VSL）、曲线运动速率（VCL）、路径速率（VAP）和侧摆幅度（ALH）），并收集发生显著变化的精液进行顶体完整性、质膜完整性以及氧化应激指标检测。 结果 L-Ala对公猪精液常温保存效果具有浓度和时间依赖性。保存前5 d，各L-Ala浓度组（0~320 μg/mL）的精子运动参数均无显著差异（P>0.05）。保存第7天时，320 μg/mL L-Ala组精液表现最优：与对照组相比，精子活力提高9.73%（P<0.05），精子运动参数（VSL、VAP、ALH）分别升高11.33%、13.08%和12.17%（P<0.05），质膜完整率和顶体完整率分别增加43.71%和26.54%（P<0.05），总抗氧化能力（T-AOC）提高1.14倍（P<0.05），丙二醛（MDA）含量降低54.91%（P<0.05）。 结论 在本试验条件下，L-Ala可有效延长公猪精液常温保存时间，其中320 μg/mL为最适浓度，能在保存后期（第7天）显著维持精子质量，其作用机制可能与增强抗氧化能力、减少脂质过氧化损伤有关。

目的 筛选宣和猪脂肪分化相关蛋白（adipose differentiation-related protein， ADRP）和脂肪酸合成酶（fatty acid synthase， FASN）基因的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）位点，并揭示SNP位点与宣和猪肉质性状的关联性。 方法 以120头宣和猪为试验对象，系统测定了其肉色、大理石纹、pH₁、滴水损失和肌内脂肪（intramuscular fat，IMF）含量等肉质性状指标，对ADRP和FASN基因进行PCR扩增及Sanger测序，筛选SNP位点，并基于最小二乘模型对各SNP位点不同基因型与宣和猪肉质性状进行关联分析。 结果 在ADRP基因第8外显子存在3个SNPs位点，其中rs325276230位点为同义突变，rs321564137和rs81217193位点为错义突变，其优势基因型分别为AA、AA和GG，优势等位基因分别为A、A和G，3个SNPs位点均符合Hardy-Weinberg平衡（P>0.05）。在FASN基因中共检出6个SNPs位点，包含4个同义突变位点（rs337531100、rs324640280、rs81478148、rs319161464）和2个错义突变位点（rs337267671、rs342967881），其优势基因型分别为TC、CC、TT、GG、GG和CT，优势等位基因分别为C、C、T、G、G和T，其中rs81478148位点偏离Hardy-Weinberg平衡（P<0.01）。关联分析结果显示，ADRP与FASN基因SNP位点与宣和猪肉质性状存在显著关联，其中，ADRP基因rs325276230位点AA基因型个体的IMF含量、大理石纹、pH₁极显著或显著高于GG基因型（P<0.01；P<0.05）；rs321564137位点AA基因型个体的IMF含量显著高于AG基因型，肉色显著低于AG基因型（P<0.05）；rs81217193位点GG基因型个体的IMF含量显著高于GA与AA基因型（P<0.05）。FASN基因rs337531100位点CC基因型个体的IMF含量显著高于TT与TC基因型（P<0.05）；rs324640280位点TT基因型个体的肉色显著高于CT基因型（P<0.05）；rs81478148位点CT基因型个体的肉色、pH₁及滴水损失极显著或显著高于TT基因型（P<0.01；P<0.05）；rs319161464位点AA基因型个体的pH₁显著低于GG和GA基因型（P<0.05）；rs337267671位点GG基因型个体的大理石纹显著高于GA与AA基因型（P<0.05）；rs342967881位点TT基因型个体的IMF含量与大理石纹均显著高于CC基因型（P<0.05）。 结论 ADRP和FASN基因SNP位点与宣和猪肉质性状存在显著关联，其中ADRP基因的rs325276230、rs321564137、rs81217193位点及FASN基因的rs337531100和rs342967881位点可作为改善宣和猪IMF含量的潜在分子标记。

目的 探讨处理方法、繁殖状态、处理月份和膘情对关岭牛同期发情效果的影响，为进一步优化关岭牛同期发情策略、提高规模化养牛场的繁殖效率提供依据。 方法 选取150头2岁以上健康关岭牛母牛，随机分为5组，每组30头，进行如下试验，并在发情鉴定后进行人工输精配种。试验一：选取中等偏上膘情的经产关岭牛在7月份采用牛用孕酮阴道栓（CIDR）+氯前列烯醇钠（PGF_2α）（试验1组）和2次PGF_2α注射（试验2组）处理，探讨两种处理方式对关岭牛同期发情效果的影响。以下试验均采用2次PGF_2α注射法进行处理，其中，试验二：选取中等偏上膘情的经产关岭牛在3月份进行处理（试验3组）；试验三：选取膘情偏瘦的经产关岭牛在7月份进行处理（试验4组）；试验四：选取中等偏上膘情的后备关岭牛母牛在7月份进行处理（试验5组）。将试验3~5组所得到的关岭牛同期发情率和情期受胎率分别与试验2组进行比较，以探讨不同处理月份、膘情和繁殖状态对同期发情效果的影响。 结果 试验1、2组关岭牛的发情率分别为93.33%和90.00%，情期受胎率分别为89.29%和88.89%，两组间差异均不显著（P>0.05）；试验3、4组关岭牛的发情率（66.67%和36.67%）及情期受胎率（75.00%和54.55%）显著或极显著低于试验2组（P<0.05；P<0.01）；试验5组关岭牛的发情率（83.33%）和情期受胎率（88.00%）与试验2组间差异均不显著（P>0.05）。 结论 同期发情处理方法和繁殖状态对关岭牛同期发情效果无显著影响，处理月份和膘情会显著影响关岭牛的同期发情效果，宜选用中上等膘情的健康母牛，在饲草丰富的温暖时节进行同期发情处理才能获得相对较好的同期化效果。

目的 鉴定引起奶牛死亡的原因，为多病原混合感染导致奶牛疾病的防治提供参考。 方法 采用平板划线法分离培养死亡奶牛乳样和血样中的病原菌，经细菌分离培养、革兰染色、16S rRNA序列分析、毒力基因鉴定等对分离株进行种属鉴定，利用纸片扩散法测定其对抗菌药的敏感性，通过动物试验进行分离株的致病性评价。 结果 乳样中细菌分离株在麦康凯培养基上呈湿润粉红色菌落的革兰阴性短杆菌。16S rRNA序列分析结果显示，分离菌与GenBank中克雷伯菌属代表菌株的序列相似性>99%，与肺炎克雷伯菌标准株ATCC 13883聚于同一分支，鉴定为肺炎克雷伯菌，将其命名为BJ-B004。毒力基因检测结果表明，该分离株含有7种毒力基因，包括fimH、uge、wabG、ureA、entB、mrkD和ycf。药敏试验结果表明，其对链霉素、青霉素、阿莫西林、氨苄西林、复方新诺明耐药，对恩诺沙星、多西环素、氟苯尼考、四环素、大观霉素、头孢哌酮等抗菌药敏感。在该死亡奶牛的血样中分离出1株具有溶血特性的革兰阴性、两端钝圆的小杆菌，多呈单个或成对排列，瑞氏-吉姆萨复合染色呈两级浓染。16S rRNA序列分析结果显示，其与曼氏杆菌菌株序列相似性>98%，与牛源曼氏杆菌菌株ZY190616聚于同一分支，鉴定为溶血性曼氏杆菌，将其命名为BJ-B007。药敏试验结果表明，其对除庆大霉素外的抗菌药均不耐药。将肺炎克雷伯菌、溶血性曼氏杆菌以及混合菌液以3×10⁷ CFU的剂量分别感染5只BALB/c小鼠，同时设PBS空白对照组（5只）结果显示，所有攻毒组小鼠均出现发病症状。48 h内混合感染组小鼠全部死亡，溶血性曼氏杆菌组死亡4只，肺炎克雷伯菌组死亡1只。病理学检查显示，溶血性曼氏杆菌引起肝脏、脾脏、肺脏、肾脏等多器官严重充血、出血及坏死病变。 结论 本研究从死亡奶牛的病料中分离到1株具有多重耐药性的肺炎克雷伯菌及1株具有高致病性的溶血性曼氏杆菌，该奶牛死亡原因为肺炎克雷伯菌感染引起乳房炎，继发条件致病菌溶血性曼氏杆菌感染引起菌血症，本研究结果为奶牛乳房炎和呼吸道综合征的联合诊断与综合防控提供科学依据。

目的 利用反向遗传操作技术构建鸡传染性法氏囊病病毒（Infectious bursal disease virus，IBDV）BJQ902株感染性克隆，为疫苗的开发及病毒复制和致病机制研究提供重要工具。 方法 以BJQ902株全基因组序列为基础，利用PCR技术扩增IBDV BJQ902株基因组A、B片段，并在A、B片段两端分别引入自裂解核酶RiboJ和HDVrz序列，利用同源重组技术将带有核酶结构的A、B片段插入到载体pCAGGS上，构建重组质粒pCAGGS-BJQ-RAH和pCAGGS-BJQ-RBH，将重组质粒pCAGGS-BJQ-RAH和pCAGGS-BJQ-RBH共转染DF-1细胞，连续盲传3代拯救重组BJQ902株（rBJQ902）。将BJQ902株及rBJQ902株感染DF-1细胞，利用PCR、Western blotting和间接免疫荧光试验（IFA）鉴定rBJQ902株。 结果 成功获得了BJQ902株基因组A、B片段，大小分别为3 260和2 827 bp；将自裂解核酶RiboJ和HDVrz序列分别连在A、B片段两端，大小分别为3 436和3 033 bp；将带有核酶序列的A、B片段分别连接到pCAGGS载体上，成功获得了重组质粒pCAGGS-BJQ-RAH和pCAGGS-BJQ-RBH；在DF-1细胞中连续盲传3代获得rBJQ902株；与亲本毒株BJQ902相比，感染DF-1细胞48 h后，rBJQ902株也可扩增得到VP2片段；rBJQ902株的病变与亲本株一致；Western blotting和IFA都可检测到rBJQ902株VP2蛋白的表达，该毒株在细胞培养中展现出与亲本病毒相似的生物学特性。 结论 本研究成功获得了BJQ902株的感染性克隆毒株rBJQ902，为深入研究 IBDV 的生物学特性及致病机制提供了技术支持，为后续病毒学研究奠定基础。

目的 探究猪德尔塔冠状病毒（Porcine deltacoronavirus， PDCoV）感染对先天性免疫的影响及免疫信号传导的干扰机制，重点解析信号传导转录激活因子1（signal transducer and activator of transcription 1， STAT1）与三方基序蛋白21（tripartite-motif protein 21， TRIM21）在此过程中的作用。 方法 通过倒置显微镜观察感染复数（multiplicity of infection， MOI）为1的PDCoV感染IPEC-J2细胞1、12、24、48 h后细胞形态学变化，采用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测PDCoV-N基因及蛋白的表达水平，以此筛选PDCoV感染IPEC-J2细胞模型的最佳条件。在PDCoV感染峰值时，通过实时荧光定量PCR和Western blotting检测STAT1、TRIM21及干扰素刺激基因（interferon-stimulated genes， ISGs）的mRNA和蛋白表达水平；通过双荧光素酶报告基因系统检测过表达或抑制STAT1对PDCoV复制及干扰素激活反应元件（interferon-stimulated response element， ISRE）启动子活性的影响；将TRIM21与STAT1真核表达载体共转染至IPEC-J2细胞，结合激光共聚焦显微镜、免疫共沉淀技术（co-immunoprecipitation， Co-IP）和Western blotting验证二者的相互作用及TRIM21对STAT1的调控效应。 结果 PDCoV在感染IPEC-J2细胞24 h达复制高峰，同时试验组细胞中STAT1、TRIM21蛋白表达及ISGs转录水平均极显著高于对照组（P<0.01）。与对照组相比，过表达STAT1后ISRE启动子活性极显著增强，PDCoV-N基因及其蛋白表达量极显著降低（P<0.01），而氟达拉滨抑制STAT1后则极显著促进病毒复制（P<0.01）。激光共聚焦显微镜观察与Co-IP结果显示，STAT1与TRIM21存在共定位及相互作用，且与对照组相比，过表达TRIM21后STAT1蛋白表达量极显著降低（P<0.01）。 结论 本研究解析了PDCoV与宿主IPEC-J2细胞先天性免疫的相互作用机制，STAT1作为关键抗病毒因子通过ISRE通路增强先天性免疫来抑制病毒复制，TRIM21则靶向STAT1并下调其表达从而帮助病毒免疫逃逸。研究结果不仅为深入理解PDCoV的致病分子机制提供了新见解，也为制定PDCoV防控策略奠定了基础。

目的 了解上海地区牛腹泻相关病毒的流行情况，为牛腹泻的防控工作提供科学依据。 方法 应用RT-PCR方法对上海地区115份腹泻牛肛拭子样品进行牛轮状病毒（BRV）、牛肠道病毒（BEV）、牛冠状病毒（BCoV）、牛病毒性腹泻病毒（BVDV）检测，并对阳性病原部分基因序列进行测序和遗传进化分析。 结果 115份腹泻牛肛拭子样品BRV、BEV和BCoV检出率相同，均为1.74%（2/115），且均为单一感染；BVDV未检出。基于BRV VP7和VP4基因的遗传进化分析结果显示，检出的2株BRV的VP7基因与加拿大株FMV1078090相似性最高，为94.1%，与美国人源轮状病毒株3000015004亲缘关系较近，均属于G6型；VP4基因与中国株HB-3相似性最高，为98.2%，均属于P［11］型，因此2株BRV基因型为G6P［11］。基于BEV 5'-UTR基因的遗传进化分析结果显示，检出的2株BEV中1株与德国株D8-01相似性最高，为90.6%，同属于E型；1株与美国株Wye 8875相似性最高，为93.5%，同属于F型；2株BEV与中国流行株的亲缘关系均较远。基于BCoV N基因的遗传进化分析结果显示，检出的2株BCoV与大多数中国株和美国株聚为一个大的分支，均处于GⅡb基因群，亲缘关系较近，与美国株Mebus和疫苗株BC94亲缘关系较远。 结论 BRV、BEV和BCoV是引起上海地区牛腹泻的主要病毒性病原，其中BRV流行基因型为G6P［11］型，BEV流行基因型为E和F型，BCoV流行基因型为GⅡb型。本研究为上海地区牛腹泻防控策略的制定提供了科学依据。

目的 建立一种快速检测鸭短喙矮小综合征病毒（Short beak and dwarfism syndrome virus，SBDSV）抗体的血清学方法，为SBDSV抗体检测及诊断试剂盒研发提供技术支撑。 方法 本研究用纯化的SBDSV M15株灭活毒免疫BALB/c小鼠，取免疫小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞（SP2/0）进行融合，利用间接ELISA筛选可分泌SBDSV单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用筛选出的杂交瘤细胞接种小鼠制备腹水。通过间接ELISA测定单克隆抗体效价，通过间接免疫荧光试验（indirect immunofluorescence assay，IFA）和胶乳凝集（latex particle agglutination，LPA）试验鉴定单克隆抗体特性。通过中和试验测定单克隆抗体中和活性，使用试剂盒鉴定单克隆抗体亚类。运用棋盘滴定法优化反应体系，建立基于SBDSV单克隆抗体的竞争ELISA检测方法。通过检测阴性血清确定该方法的临界值。对建立的竞争ELISA检测方法进行特异性、灵敏性和重复性测定。用该方法检测临床血清样品，并与胶乳凝集抑制（latex particle agglutination inhibition，LPAI）试验结果进行比对。 结果 经间接ELISA筛选，获得3株稳定分泌SBDSV单克隆抗体的杂交瘤细胞，分别命名为D5-3、G11-23和H2-27。间接ELISA结果显示，3株杂交瘤细胞D5-3、G11-23和H2-27培养上清的抗体效价分别为1∶2⁶、1∶2⁵和1∶2⁶，腹水的抗体效价分别为1∶10⁵、1∶10⁴和1∶10⁶。IFA结果显示，单克隆抗体D5-3、G11-23和H2-27均具有较好的结合活性，可用于IFA检测。LPA试验结果显示，仅单克隆抗体H2-27具有致敏胶乳的特性。中和试验结果显示，3株单克隆抗体均具有中和SBDSV的能力，其中单克隆抗体H2-27的中和活性最强。单克隆抗体亚类鉴定结果显示，单克隆抗体D5-3和G11-23均为IgG1，H2-27为IgM。以纯化的SBDSV（M15株）灭活毒作为包被抗原，单克隆抗体H2-27为竞争抗体，建立了一种检测SBDSV抗体的竞争ELISA方法，当抑制率（PI）≥23.70%时，判定为SBDSV抗体阳性；PI≤15.91%时判定为阴性。该方法特异性好，与番鸭细小病毒（Muscovy duck parvovirus，MDPV）、番鸭呼肠孤病毒（Muscovy duck reovirus，MDRV）、鸭源副黏病毒（Duck paramyxovirus，DPMV）、鸭肝炎病毒1型（Duck hepatitis virus-1，DHV-1）和鸭坦布苏病毒（Duck Tembusu virus，DTMUV）阳性血清均无交叉反应；敏感性高，高免血清（LPAI效价1∶2⁸）1∶25 600稀释时仍为阳性；批间、批内重复性好，变异系数均<6%。竞争ELISA检测结果与LPAI结果具有良好的正相关性，二者的符合率为89.10%（188/211）。 结论 本研究成功制备3株SBDSV单克隆抗体，基于单克隆抗体H2-27建立的竞争ELISA方法特异性强、灵敏度高、重复性好，可高通量检测SBDSV抗体，为监测SBDSV在中国的流行情况及雏鸭母源抗体水平评价提供技术支撑。

目的 了解信阳地区鸭星状病毒1型（Duck astrovirus type 1， DAstV1）流行株基因组的演化特征，为进一步研究信阳地区DAstV1的流行、遗传进化及致病特性提供参考依据。 方法 对某养殖场送检的病鸭进行禽腺病毒、禽星状病毒和鸭甲型肝炎病毒等12种常见病毒的PCR/RT-PCR筛查。采集病鸭肝脏组织，无菌处理后经卵黄囊途径接种10日龄SPF鸭胚，连续传代4次，并逐代收集尿囊液进行DAstV RT-PCR鉴定。对分离到的病毒进行全基因组测序，并对ORF1a、ORF1b和ORF2基因序列及其编码蛋白的氨基酸变异位点进行比对分析。 结果 送检病料筛查结果显示，禽星状病毒呈阳性。第1~4代鸭胚尿囊液中均呈DAstV1阳性，将该病毒命名为HN24XY06。第4代接种鸭胚全部死亡，死亡胚体发育不良且体表出血。HN24XY06基因组全长7 755 nt，包含ORF1a、ORF1b和ORF2 3个开放阅读框。序列比对和系统发育分析表明，HN24XY06属于DAstV1毒株，与山东分离株DAstV-SDZZ和DAstV-SDWF亲缘关系较近。ORF1a、ORF1b和ORF2蛋白的氨基酸序列分析显示，存在不同程度的突变，多发生在ORF1a编码的氨基酸序列中。 结论 本研究分离到了1株DAstV1，丰富了信阳地区DAstV1的分子流行病学资料，并为进一步研究DAstV1的致病机制奠定了基础。

目的 研究鸡DDX21 RNA解旋酶的结构与功能，探索其是否参与H9N2亚型禽流感病毒（AIV）诱导的天然免疫反应。 方法 本研究扩增并克隆了鸡DDX21基因，通过生物信息学方法分析其基因序列；利用大肠杆菌表达系统通过IPTG诱导表达鸡DDX21重组蛋白；以纯化的重组蛋白为免疫原，制备鸡DDX21多克隆抗体，采用间接ELISA检测抗体的血清效价；应用Western blotting方法检测多克隆抗体与内源性鸡DDX21蛋白的反应情况。 结果 PCR扩增的鸡DDX21基因编码区序列为2 145 bp，编码714个氨基酸；克隆至pMD18-T载体的鸡DDX21基因经测序后的核酸序列与GenBank数据库公布的预测序列（登录号：XM_040675361.2）一致；鸡DDX21与鸟类进化关系较近，氨基酸序列相似性为68.8%~89.7%，属于禽类分支；鸡DDX21蛋白包含高度保守的DEXDc、HELICc和GUCT结构域，其蛋白三级结构与人DDX21蛋白结构模型相似性为82.71%。纯化后的鸡DDX21重组蛋白大小为101 ku，与预期相符；制备的兔抗鸡DDX21抗体血清效价达到1∶320 000，且该多克隆抗体能识别内源性鸡DDX21蛋白。鸡DDX21蛋白在H9N2亚型AIV感染鸡的多个组织中表达量上调，表明病毒感染增强鸡DDX21蛋白的表达。 结论 本研究成功克隆并分析了鸡DDX21的基因序列，制备的兔抗鸡DDX21多克隆抗体能识别内源性蛋白，为后续深入研究鸡DDX21蛋白调控Ⅰ型干扰素信号通路的分子机制奠定了基础。

目的 分离并筛选海洋源β-内酰胺类抗生素降解细菌，分析其降解活性和全基因组，为修复环境中β-内酰胺类抗生素污染提供新的思路。 方法 采集湛江地区的海水，使用含有青霉素钾、阿莫西林、头孢曲松钠的选择培养基分离和筛选海水中的细菌，通过快速生物降解试验测定分离菌的降解率，对具有降解活性的菌株进行分子生物学鉴定并绘制时间-降解曲线，选择在120 h内降解超过90%抗生素的降解菌，分析其在更高初始抗生素浓度下的降解效果，筛选降解效果最好的1株细菌进行全基因组测序分析。 结果 从湛江地区的海水中筛选出18株β-内酰胺类抗生素耐药菌，其中5株细菌能快速降解β-内酰胺类抗生素。菌株DA02和DA03能在120 h内降解99.12%和91.21%初始浓度为100 mg/L的头孢曲松钠，且DA02能快速降解初始浓度为300 mg/L的头孢曲松钠。16S rRNA基因序列比对分析结果显示，菌株DA02为嗜麦芽窄食单胞菌。全基因组测序鉴定菌株DA02基因组大小为4 786 356 bp，GC含量为66.58%，共预测到4 253个编码基因，73个tRNAs和7个rRNAs，发现多个编码β-内酰胺酶的基因，包括L1_BLA、LRA-18、NmcR、PSV-1、SRT-1，且该菌含有多种抗生素耐药基因，如AAC（6'）、APH（3'）、cmlv和arr-2，以及丰富的碳水化合物代谢途径基因，参与碳代谢、硫代谢和氮代谢的基因分别有91、12和13个。 结论 海水中存在高效的β-内酰胺类抗生素降解菌，本研究全基因组分析揭示了头孢曲松钠降解菌DA02的可能降解机制和生物修复潜力，为修复环境中β-内酰胺类抗生素污染提供了潜在的有效方法。

目的 借助网络药理学、分子对接及细胞试验深入探究麻杏石甘汤对牛支原体感染的治疗机制，为传统中药的现代化提供科学依据，也为治疗牛支原体感染提供新的策略。 方法 以TCMSP、PubChem、SwissTargetPrediction等生物信息学平台为依托，筛选出麻杏石甘汤各味药物活性成分及相关靶点；通过GeneCards、OMIM数据库获取牛支原体相关疾病的靶点；用STRING数据库构建蛋白-蛋白互作网络，借助Cytoscape 3.9.1软件进行网络拓扑分析，同时用DAVID平台进行GO功能与KEGG通路富集分析；运用PyMOL 2.4.0和AutoDockTool 1.5.6软件完成分子对接与可视化。将MDBK细胞分为空白对照组、模型组及低、中、高剂量（2.5、5和10 mg/mL）麻杏石甘汤组，除空白对照组外，其余各组以感染复数为1 000的牛支原体PG45感染4 h，清洗后分别更换为含药培养基或完全培养基，继续培养24 h，采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中的Ct值及相关炎症因子mRNA表达水平。 结果 网络药理学研究发现，麻杏石甘汤含有134个活性成分，牛支原体相关疾病靶点93个，二者的交集靶点共20个，其中白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、基质金属蛋白酶9（MMP9）、半胱天冬酶3（CASP3）、前列腺素内过氧化物合酶2（PTGS2）等为关键核心靶点。GO功能富集分析主要涉及RNA聚合酶Ⅱ对转录的正向调控、细胞外空间、细胞质、细胞核、细胞因子活性等；KEGG通路富集分析主要涵盖IL-17、TNF、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）等相关信号通路。分子对接结果表明，麻杏石甘汤的活性成分与关键核心靶点的结合能均<-17.8 kJ/mol，具有良好的结合能力。其中，槲皮素与CASP3结合能最小，为-28.87 kJ/mol。细胞试验结果显示，与模型组相比，各剂量麻杏石甘汤组Ct值均显著升高（P<0.05），显著升高了IL-2、IL-10基因表达量（P<0.05），降低了IL-6、IL-8、TNF-α、IL-17A、CASP3、MMP9、PTGS2基因表达量（P<0.05）。 结论 本研究通过网络药理学预测及细胞试验验证揭示了麻杏石甘汤通过作用于IL-6、TNF、MMP9等靶点，调控炎症因子的分泌，抑制炎症反应，从而发挥抗牛支原体感染作用。

目的 从肉骨渣中筛选耐高温高产蛋白酶的微生物资源，优化其产酶工艺，为工业化开发应用提供理论依据。 方法 以富含蛋白质的肉骨渣为菌株分离源，基于高温生存能力与酪蛋白降解活性筛选耐高温产蛋白酶菌株。通过形态观察、生理生化特性及16S rRNA序列分析进行菌种鉴定；以蛋白酶活为指标，采用单因素试验与响应面法优化培养条件，并利用紫外诱变与高温驯化提升菌株酶活与耐高温能力。 结果 从肉骨渣发酵物中分离鉴定出1株苍白空气芽孢杆菌（Aeribacillus pallidus）60；经优化获得其最佳产酶工艺为：0.89% NaCl、1.37% Ca²⁺ 、0.5% Mg²⁺、pH 8.87，培养时间86.29 h，在此条件下蛋白酶活较未优化菌株提高59.51%。进一步经3次紫外诱变，酶活在优化基础上提升24.65%（P<0.01）；高温驯化后菌株耐热能力提高至70 ℃，酶活进一步提升24.16%（P<0.01）。 结论 苍白空气芽孢杆菌60具有优良的耐高温与产蛋白酶能力，通过条件优化与诱变驯化可显著提升其酶活。试验结果为该菌在工业生产中的应用提供了理论依据与菌种资源。

目的 探究儿茶素对乳房炎小鼠的保护作用，研究谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4，GPX4）/溶质载体家族7成员11（solute carrier family 7 member 11，SLC7A11）信号通路对铁死亡的调节作用。 方法 选取20只分娩后7~10 d雌性小鼠，采用随机分组法将其分为5组：空白对照组、脂多糖（LPS）造模组、儿茶素低剂量组（40 mg/kg）、儿茶素高剂量组（80 mg/kg）及地塞米松阳性对照组。儿茶素低、高剂量组小鼠按相应剂量浓度灌胃给予儿茶素，其余组小鼠给予同等剂量生理盐水，每只0.3 mL，连续7 d。灌胃完成后，阳性对照组小鼠经腹腔注射100 μL 2 mg/mL地塞米松。2 h后，除空白对照组外，其余各组小鼠于第4对乳头左右侧经乳头乳导管各注射50 μL 0.2 mg/mL LPS建立乳房炎模型。比较造模后各组小鼠的体重变化，通过HE染色观察各组小鼠乳腺组织病理学变化，采用生化试剂盒检测乳腺组织中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性。利用Western blotting检测小鼠乳腺组织中GPX4、SLC7A11和铁蛋白重链（FTH）蛋白表达量，并采用免疫荧光检测乳腺组织中FTH、GPX4蛋白荧光强度。 结果 与空白对照组相比，LPS组小鼠体重呈下降趋势，而儿茶素处理组小鼠体重表现增加趋势。HE染色结果显示，空白对照组小鼠乳腺腺泡结构完整，未见炎性细胞浸润；LPS组小鼠乳腺腺泡内有大量炎性细胞浸润以及腺泡萎缩；儿茶素高、低剂量组和地塞米松阳性对照组小鼠乳腺损伤明显减轻。与空白对照组相比，LPS组小鼠乳腺组织中MDA含量显著升高、SOD活性显著降低（P<0.05）。与LPS组相比，儿茶素高、低剂量组小鼠乳腺组织中MDA含量显著下降、SOD活性显著升高（P<0.05）。Western blotting结果显示，与空白对照组相比，LPS组小鼠乳腺组织中GPX4、SLC7A11、FTH蛋白表达量均显著下降（P<0.05）。与LPS组相比，儿茶素高、低剂量组小鼠乳腺组织中GPX4、SLC7A11、FTH蛋白表达量显著升高（P<0.05）。免疫荧光检测结果显示，与空白对照组相比，LPS组小鼠乳腺组织中GPX4、FTH蛋白相对荧光强度显著降低（P<0.05）。与LPS组相比，儿茶素高剂量组小鼠乳腺组织中GPX4、FTH蛋白相对荧光强度显著增加（P<0.05）。 结论 儿茶素能显著减轻LPS诱导的小鼠乳房炎损伤，其保护作用与抑制乳房炎小鼠的铁死亡密切相关。儿茶素通过上调SLC7A11表达，增强机体抗氧化能力，进而提高GPX4活性，最终减少MDA积累，从而发挥对铁死亡的抑制作用。

目的 探究芦丁对脂多糖（LPS）诱导的绵羊瘤胃上皮细胞屏障功能、炎症损伤的影响。 方法 体外培养绵羊瘤胃上皮细胞，用不同浓度LPS（0、1、5、10、50、100 μg/mL）刺激建立瘤胃上皮细胞损伤模型，确定LPS的最佳作用浓度和作用时间。以不同浓度芦丁（0、25、50、100、150 μg/mL）对瘤胃上皮细胞进行预处理，采用MTT法检测细胞活力，计算细胞相对增殖率，确定芦丁的适宜作用浓度和作用时间。基于筛选的LPS和芦丁作用浓度和时间进行细胞分组处理，分别为对照组（CON）、LPS组、芦丁组（R）以及芦丁干预组（R+LPS）。利用ELISA试剂盒测定细胞上清液中白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-10含量；通过实时荧光定量PCR检测IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、TNF-α、γ-干扰素（IFN-γ）、CXC趋化因子配体8（CXCL8）、CXCL9、咬合蛋白（Occludin）、闭锁小带蛋白-1（ZO-1）、闭合蛋白-1（Claudin-1）、Claudin-4的mRNA相对表达量。 结果 通过试验筛选，最终确定1 μg/mL LPS作用9 h作为建立瘤胃上皮细胞损伤模型的最佳作用条件；100 µg/mL芦丁处理8 h作为芦丁在体外对瘤胃上皮细胞预保护的最佳作用条件。与CON组相比，LPS组细胞上清液中IL-1β、TNF-α含量均显著升高（P<0.05），IL-10含量显著降低（P<0.05）。与LPS组相比，R+LPS组细胞上清液中IL-1β、TNF-α含量显著降低（P<0.05），IL-10含量显著升高（P<0.05）。实时荧光定量PCR结果显示，与CON组相比，LPS组瘤胃上皮细胞中IL-1β、IL-6、IL-12、TNF-α、IFN-γ、CXCL8、CXCL9 mRNA表达量显著升高（P<0.05），IL-4、IL-10、Claudin-4、ZO-1 mRNA表达量显著降低（P<0.05）。与LPS组相比，R+LPS组瘤胃上皮细胞中IL-1β、IL-6、IL-12、TNF-α、INF-γ、CXCL8、CXCL9 mRNA表达量显著降低（P<0.05），IL-4、IL-10、ZO-1、Claudin-4 mRNA表达量显著升高（P<0.05）。 结论 本试验条件下，100 µg/mL芦丁作用8 h对LPS诱导的瘤胃上皮细胞屏障功能和炎症损伤具有明显的保护作用。

目的 结合液相色谱-质谱联用（LC-MS）技术与网络药理学方法，探讨半枝莲中发挥抗肿瘤作用的关键活性成分、潜在作用靶点及其调控机制，为阐明其药效基础提供理论支持。 方法 采用LC-MS技术对半枝莲提取物进行正负离子模式下的质谱分析，鉴定其主要化学成分。基于网络药理学方法，综合运用多种数据库与生物信息学工具，探索半枝莲抗肿瘤的关键活性成分及其作用机制。通过TCMSP平台筛选符合口服生物利用度（OB）≥30%与类药性（DL）≥0.18标准的候选化合物，并通过SwissTargetPrediction预测其潜在靶点。结合GeneCards与OMIM数据库收集肿瘤相关基因信息，取交集后确定关键作用靶点。进一步借助STRING软件构建蛋白互作网络（PPI）并进行拓扑分析，筛选核心靶点。利用Metascape平台对其进行GO功能注释与KEGG通路富集分析，明确其生物学功能与信号通路。通过Cytoscape软件构建“成分-靶点-疾病”与“靶点-通路”网络图，直观展示半枝莲抗肿瘤的潜在分子机制。采用分子对接技术对核心活性成分与关键靶点进行验证。 结果 通过LC-MS分析，在负离子模式下共鉴定出半枝莲中14个主要成分，包括木犀草素、黄芩素、汉黄芩素等黄酮类化合物，其中苏荠黄酮、黄芩素、汉黄芩素等靶点关联较多。共筛选出29个潜在活性成分和330个作用靶点，与肿瘤靶点交集得到95个关键靶点（如AKT1、VEGFA、EGFR、ESR1等）。PPI网络显示，AKT1、VEGFA、EGFR为核心靶点。GO功能富集分析显示，核心靶点主要涉及细胞增殖、凋亡、血管生成等；KEGG通路显著富集于PI3K-Akt、FoxO、p53等肿瘤相关信号通路。分子对接结果表明，核心活性成分黄芩素、汉黄芩素与关键靶点AKT1、EGFR、VEGFA、ESR1均具有良好的结合活性，进一步验证了网络药理学预测结果的可靠性。 结论 半枝莲主要通过黄芩素、汉黄芩素等黄酮类活性成分，协同作用于AKT1、VEGFA、EGFR等关键靶点，显著调控PI3K-Akt、p53及FoxO等信号通路，从而抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡并阻断血管生成。本试验结果从“成分-靶点-通路”多维角度阐明了半枝莲多途径协同抗肿瘤的分子机制，为其临床应用及新药研发提供了重要理论依据。