鸡肠炎沙门氏菌ompA基因的克隆与表达

›› 2012, Vol. 39 ›› Issue (12): 20-23.

鸡肠炎沙门氏菌ompA基因的克隆与表达

余波, 徐景峨, 王璇, 谭诗文

贵州省畜牧兽医研究所,贵州贵阳 550005

收稿日期:2012-05-28 出版日期:2012-12-20 发布日期:2012-12-19
通讯作者: 徐景峨(1981-),女,助理研究员,硕士,研究方向:兽医微生物。E-mail:xje0809@163.com E-mail:xje0809@163.com
作者简介:余波(1981-),男,四川人,助理研究员,硕士,研究方向:兽医微生物。
基金资助:
贵州省科学技术基金项目;贵州省畜禽健康养殖技术创新能力建设项目;中央补助地方科技基础条件专项基金项目。

Cloning and Expression of ompA Gene of Salmonella enteritidis from Chickens

YU Bo, XU Jing-e, WANG Xuan, TAN Shi-wen

Guizhou Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Guiyang 550005,China

Received:2012-05-28 Online:2012-12-20 Published:2012-12-19

摘要/Abstract

摘要： 根据GenBank中鸡肠炎沙门氏菌ompA基因序列设计1对引物,以鸡肠炎沙门氏菌贵州分离株基因组为模板,扩增鸡肠炎沙门氏菌ompA基因,将其亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组表达质粒pET-32a-ompA,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞, 经IPTG诱导, 实现了鸡肠炎沙门氏菌ompA蛋白在大肠杆菌中的表达。SDS-PAGE分析结果表明, 该重组蛋白的分子质量约为55 ku,可溶性分析结果表明表达蛋白大部分以包涵体形式存在。Western blotting分析结果表明,该重组蛋白具备免疫原性。

关键词: 鸡; 肠炎沙门氏菌; ompA基因; 原核表达

Abstract: According to the gene sequences in GenBank of Salmonella enteritidis from chickens, one pair of specific primers was designed for amplifying the specific fragments of ompA gene. The ompA gene was amplified from the isolated Guizhou strain of SE by PCR, and subcloned the sequence into the prokaryotic expression vector pET-32a(+).The recombinant plasmid pET-32a-ompA was transformed into E.coli BL21(DE3) and expressed under the induction of IPTG. The result of SDS-PAGE showed that the expressed protein was about 55 ku, and the recombinant protein was in form of inclusion bodies. Western blotting analysis indicated that this protein had immunological activity.

Key words: chickens; Salmonella enteritidis; ompA gene; prokaryotic expression

中图分类号:

R378.2⁺2

余波, 徐景峨, 王璇, 谭诗文. 鸡肠炎沙门氏菌ompA基因的克隆与表达[J]. , 2012, 39(12): 20-23.

YU Bo, XU Jing-e, WANG Xuan, TAN Shi-wen. Cloning and Expression of ompA Gene of Salmonella enteritidis from Chickens[J]. China Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2012, 39(12): 20-23.

[1]	李嘉宁, 蒋志惠, 邢月腾, 马圣明. 饲粮中添加桉叶素对蛋鸡和鸡蛋抗氧化能力的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(7): 3016-3030.
[2]	李军, 尹磊, 杨莹, 胡建新, 汤莉, 秦清明, 梁成成, 吴海港, 赵梦婷, 段文淼. 发酵床垫料组成对青脚麻鸡生长性能、消化酶活性、血清生化及免疫指标的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(7): 3047-3058.
[3]	卢欣欣, 付凯博, 李思漫, 张海华, 张海军, 邱凯, 武书庚. 生长前期饲粮添加苹果酸对肉鸡生长性能、肉品质、血清生化指标及肠道健康的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(7): 3104-3115.
[4]	陈万虹, 张梦玲, 杨文鹏, 朱沛霁, 贾代汉, 赵敏孟, 张军, 李军, 龚道清. 不同能量和蛋白质水平饲粮对雪山鸡种母鸡生产性能的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(7): 3145-3154.
[5]	陈旭珂, 普娜, 张玉霞, 赵文卿, 赵家欣, 黄俊程, 魏琳颖, 张艳艳, 孙艳, 薄新文, 王正荣. 细粒棘球绦虫MAPⅡ生物信息学分析及其在虫体不同阶段表达差异研究[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(7): 3286-3296.
[6]	张翩, 陈晶, 张晓晓, 麦小鹏, 唐科, 向华, 王刚, 罗胜军, 马惠海, 袁子国, 王晓虎. 弓形虫GRA1蛋白表达及间接ELISA检测方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(7): 3308-3320.
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[8]	袁明贵, 李亚晖, 何隽桁, 唐兴刚, 八晓敏, 赵亚君, 田雅, 赖幸茹, 向蓉, 杨希. 牡荆提取物对肉鸡坏死性肠炎的预防作用[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(6): 2736-2749.
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[10]	解慧梅, 殷韶杰, 贾青辉, 张君胜, 周海云, 穆晓惠, 李卫晴, 程念龙. 四黄散对鸡传染性支气管炎的治疗效果及肠道菌群的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(6): 2904-2914.
[11]	徐扩卫, 冷堂健, 熊宝, 李金燕, 郭盘江, 吴培福, 陈粉粉, 周杰珑. 宁蒗高原鸡全基因组选择信号分析[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(5): 1941-1954.
[12]	张关锋, 宋先凡, 闫昭明, 杨小进, 郑梦莉, 刘雅婷, 陈清华. 饲粮中添加超氧化物歧化酶对肉鸡生长性能、免疫性能、抗氧化能力和肠道功能的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(5): 1987-1998.
[13]	王贝贝, 郝二英, 张海华, 张海军, 邱凯, 武书庚. 饲粮中添加有机锰铁铜锌复合制剂对蛋鸡生产性能、血液生化指标、卵巢功能和胫骨质量的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(5): 2012-2022.
[14]	兰忠岐, 李鹏, 沈爽, 蒋金凤, 秦鸿灯, 向钰婷, 王家乡. 饲粮中添加表皮生长因子对蛋鸡卵巢形态学、激素含量及凋亡因子表达的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(5): 2035-2044.
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