鸡γ-干扰素基因的克隆及原核表达

›› 2012, Vol. 39 ›› Issue (3): 47-50.

鸡γ-干扰素基因的克隆及原核表达

芦芝川^1,2, 史耀旭², 杨孝朴¹

1. 甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州 730070;2. 中农威特生物科技股份有限公司甘肃兰州 730046

收稿日期:2011-11-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2012-03-20 发布日期:2012-03-20
通讯作者: 杨孝朴

Cloning and Expression of Chicken IFN-γ Gene

LU Zhi-chuan^1,2, SHI Yao-xu², YANG Xiao-pu¹

1. College of Veterinary Medicine, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070,China;2. China Agriculture Vet.Bio.Science and Technology Co., Ltd , Lanzhou 730046, China

Received:2011-11-01 Revised:1900-01-01 Online:2012-03-20 Published:2012-03-20

摘要/Abstract

摘要： 参照Digby 发表的鸡γ-干扰素的核苷酸序列,设计1对引物,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从Con A诱导过的鸡脾淋巴细胞中特异性的扩增出大小约为 500 bp的基因片段。将该扩增基因进行克隆测序,结果表明其序列与Digby报道的CHIFN-γ基因序列的同源性达100%。将该基因插入原核表达载体pGEX-4T-1中构建成重组表达载体pGEX-CHIFN-γ,并将其导入大肠杆菌BL21中,诱导表达的重组蛋白经 SDS-PAGE 分析分子质量约为 43 ku,表明所克隆的CHIFN-γ 基因在原核细胞中得到表达。

关键词: γ-干扰素; 鸡; 克隆; 表达

Abstract: The total RNA was abstracted from the concanavalin A(Con A) -activated spleen lymphocytes, a pair of specific primers was designed by Oligo software based on the sequence of chicken interferon-gamma submitted by digby in GenBank(accession No.U27465). A 500 bp DNA fragment was amplified by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and then ligated into T-easy vector for sequencing. The results showed that the fragment contained the complete open reading frame (ORF) of CHIFN-γ gene. In comparison with GenBank data, the homology of the nucleotide sequence was 100%.The sequence was inserted into pGEX-4T-1 and the recombined expressing vector was constructed, then transformed into Escherichia coli BL21, which were further induced by IPTG and cultured,and a fusion protein was obtained with about 43 ku of molecular weight in SDS-PAGE.This results showed that the cloned CHIFN-γ gene was expressed in prokaryotic cells.

Key words: interferon-γ; chicken; cloning; expression

中图分类号:

芦芝川;史耀旭;杨孝朴. 鸡γ-干扰素基因的克隆及原核表达[J]. , 2012, 39(3): 47-50.

LU Zhi-chuan;SHI Yao-xu;YANG Xiao-pu. Cloning and Expression of Chicken IFN-γ Gene[J]. China Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2012, 39(3): 47-50.

[1]	郑好, 刘梦云, 王明玉, 董霞, 史良玉, 余博, 杨宇, 周傲, 陈星. 鸭ARHGDIB基因克隆、生物信息学及组织表达研究[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(7): 3004-3015.
[2]	李嘉宁, 蒋志惠, 邢月腾, 马圣明. 饲粮中添加桉叶素对蛋鸡和鸡蛋抗氧化能力的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(7): 3016-3030.
[3]	李军, 尹磊, 杨莹, 胡建新, 汤莉, 秦清明, 梁成成, 吴海港, 赵梦婷, 段文淼. 发酵床垫料组成对青脚麻鸡生长性能、消化酶活性、血清生化及免疫指标的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(7): 3047-3058.
[4]	卢欣欣, 付凯博, 李思漫, 张海华, 张海军, 邱凯, 武书庚. 生长前期饲粮添加苹果酸对肉鸡生长性能、肉品质、血清生化指标及肠道健康的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(7): 3104-3115.
[5]	陈万虹, 张梦玲, 杨文鹏, 朱沛霁, 贾代汉, 赵敏孟, 张军, 李军, 龚道清. 不同能量和蛋白质水平饲粮对雪山鸡种母鸡生产性能的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(7): 3145-3154.
[6]	李指全, 傅思静, 徐舒平, 高萌若, 杨涛涛, 张志榜, 李凯, 李鹏成. 武夷黑猪HSPA5基因克隆、生物信息学分析及组织表达研究[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(7): 3214-3224.
[7]	陈旭珂, 普娜, 张玉霞, 赵文卿, 赵家欣, 黄俊程, 魏琳颖, 张艳艳, 孙艳, 薄新文, 王正荣. 细粒棘球绦虫MAPⅡ生物信息学分析及其在虫体不同阶段表达差异研究[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(7): 3286-3296.
[8]	张翩, 陈晶, 张晓晓, 麦小鹏, 唐科, 向华, 王刚, 罗胜军, 马惠海, 袁子国, 王晓虎. 弓形虫GRA1蛋白表达及间接ELISA检测方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(7): 3308-3320.
[9]	杨泉, 李晓, 闫尊强, 王鹏飞, 黄晓宇, 高小莉, 杨巧丽, 滚双宝, 杨姣姣. 合作猪CXCL12基因克隆、生物信息学分析及组织表达研究[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(6): 2482-2493.
[10]	楚洪恩, 刘源, 冯雪, 白雪, 杨梦丽, 李娟, 贺丽霞, 刘爽, 冯兰, 马云. 牛TGFB1基因克隆、生物信息学及组织表达分析[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(6): 2506-2518.
[11]	汤莉, 邓凯伟, 何书海, 李军, 秦清明, 梁成成, 吴海港, 韩旭, 鲁佳宁. 绿茶浸提液对青脚麻鸡消化酶活性、营养物质表观代谢率和血清生化指标的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(6): 2552-2560.
[12]	闪金研, 连凯琪, 马峻, 刘玉玲, 聂竹兰, 李斌顺, 彭仁海, 魏杰. 淇河鲫Runx2b基因克隆、序列分析及时空表达[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(6): 2717-2728.
[13]	袁明贵, 李亚晖, 何隽桁, 唐兴刚, 八晓敏, 赵亚君, 田雅, 赖幸茹, 向蓉, 杨希. 牡荆提取物对肉鸡坏死性肠炎的预防作用[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(6): 2736-2749.
[14]	魏黄思梧, 张兴艺, 黄校花, 刘昌锦, 武文杰, 沈政乔, 罗锋, 邓舜洲. 猪轮状病毒VP6蛋白的真核表达及单克隆抗体制备和应用[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(6): 2750-2761.
[15]	孟昭英, 靳换, 涂敏, 胡格, 章振华. 鸡补体受体Ⅱ蛋白兔多克隆抗体制备及鉴定[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(6): 2772-2780.