兔防御素基因NP-1的克隆及其在大肠杆菌中的表达

中国畜牧兽医

兔防御素基因NP-1的克隆及其在大肠杆菌中的表达

秦晓玉^1,2, 彭章华³, 董晓², 苗向阳¹, 罗庆苗¹

1. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京 100193;
2. 青岛农业大学,山东青岛 266109;
3. 四川泸县畜牧局,四川泸州 646100

收稿日期:2012-03-13 出版日期:2012-09-20 发布日期:2012-09-18
通讯作者: 董晓,女,副教授,博士。E-mail:dongxiao518@sohu.com苗向阳,男,博士,研究员。E-mail:mxy32@sohu.com E-mail:dongxiao518@sohu.com; mxy32@sohu.com
作者简介:秦晓玉(1984－),女,山东人,硕士生,研究方向:生物化学与分子生物学。
彭章华(1967－),男,四川人,研究方向:遗传育种与繁殖。秦晓玉和彭章华对本文具有同等贡献,并列为第一作者。
基金资助:
国家高技术研究发展863计划项目(2008AA10Z140);中国农业科学院创新基金项目(2004-院-1)资助。

Artificial Synthesis of Rabbit Defensin NP-1 Gene and its Expression in E.coli

QIN Xiao-yu^1,2, PENG Zhang-hua³, DONG Xiao², MIAO Xiang-yang¹, LUO Qing-miao¹

1. Institute of Animal Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China;
2. Qingdao Agricultural University, Qingdao 266109, China;
3. Sichuan Luxian Country Animal Husbandry Bureau, Luzhou 646100,China

Received:2012-03-13 Online:2012-09-20 Published:2012-09-18

摘要/Abstract

摘要： 选用大肠杆菌偏嗜性的密码子对兔防御素基因NP-1进行改造,人工合成编码NP-1成熟肽的基因片段,并将其克隆到T-easy载体上,再经双酶切后重组于原核表达载体pMAL-p2X。经IPTG诱导后,在大肠杆菌TB1中融合表达出兔防御素NP-1成熟肽。

关键词: 畜牧学; 防御素; 融合蛋白; 表达

Abstract: The mature peptide sequence of rabbit defensin NP-1 gene was modified with favour codes for E.coli and synthesized chemically.The target gene fragment modified was cloned into vector T-easy,and then inserted into fusion expression plasmid pMAL-p2X through digesting of two restriction enzymes.The positive recombinant expression vector pMAL-NP-1 was transformed into E.coli TB1,which could effectively produce the fusion protein MBP and NP-1 induced with IPTG.

Key words: animal science; defensin; fusion protein; expression

中图分类号:

秦晓玉, 彭章华, 董晓, 苗向阳, 罗庆苗. 兔防御素基因NP-1的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J]. 中国畜牧兽医.

QIN Xiao-yu, PENG Zhang-hua, DONG Xiao, MIAO Xiang-yang, LUO Qing-miao. Artificial Synthesis of Rabbit Defensin NP-1 Gene and its Expression in E.coli[J]. China Animal Husbandry & Veterinary Medicine.

[1]	郑好, 刘梦云, 王明玉, 董霞, 史良玉, 余博, 杨宇, 周傲, 陈星. 鸭ARHGDIB基因克隆、生物信息学及组织表达研究[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(7): 3004-3015.
[2]	李指全, 傅思静, 徐舒平, 高萌若, 杨涛涛, 张志榜, 李凯, 李鹏成. 武夷黑猪HSPA5基因克隆、生物信息学分析及组织表达研究[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(7): 3214-3224.
[3]	陈旭珂, 普娜, 张玉霞, 赵文卿, 赵家欣, 黄俊程, 魏琳颖, 张艳艳, 孙艳, 薄新文, 王正荣. 细粒棘球绦虫MAPⅡ生物信息学分析及其在虫体不同阶段表达差异研究[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(7): 3286-3296.
[4]	张翩, 陈晶, 张晓晓, 麦小鹏, 唐科, 向华, 王刚, 罗胜军, 马惠海, 袁子国, 王晓虎. 弓形虫GRA1蛋白表达及间接ELISA检测方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(7): 3308-3320.
[5]	杨泉, 李晓, 闫尊强, 王鹏飞, 黄晓宇, 高小莉, 杨巧丽, 滚双宝, 杨姣姣. 合作猪CXCL12基因克隆、生物信息学分析及组织表达研究[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(6): 2482-2493.
[6]	楚洪恩, 刘源, 冯雪, 白雪, 杨梦丽, 李娟, 贺丽霞, 刘爽, 冯兰, 马云. 牛TGFB1基因克隆、生物信息学及组织表达分析[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(6): 2506-2518.
[7]	闪金研, 连凯琪, 马峻, 刘玉玲, 聂竹兰, 李斌顺, 彭仁海, 魏杰. 淇河鲫Runx2b基因克隆、序列分析及时空表达[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(6): 2717-2728.
[8]	魏黄思梧, 张兴艺, 黄校花, 刘昌锦, 武文杰, 沈政乔, 罗锋, 邓舜洲. 猪轮状病毒VP6蛋白的真核表达及单克隆抗体制备和应用[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(6): 2750-2761.
[9]	孟昭英, 靳换, 涂敏, 胡格, 章振华. 鸡补体受体Ⅱ蛋白兔多克隆抗体制备及鉴定[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(6): 2772-2780.
[10]	李天秀, 李昕鹏, 董新星, 兰国湘, 严达伟, 朱家位. 丽江猪HMOX2基因扩增、序列分析及组织表达研究[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(5): 2219-2231.
[11]	黄小久, 雷磊, 彭小烨, 王开心, 陈英仪, 王济贤, 王玉格, 段德勇, 杨毅, 王爱兵. 稳定过表达NM-ⅡA Tail的IPEC-J2细胞系构建及其对PEDV感染的影响研究[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(5): 2243-2252.
[12]	刘敏, 程淮, 郑珍珍, 张梦思, 张贺伟, 任静强. 犬副流感病毒N蛋白的真核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(5): 2287-2294.
[13]	黎小银, 刘萌, 武新学, 罗璠, 高彦华. β-防御素yTAP对小鼠肠道形态及菌群多样性的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(5): 2379-2391.
[14]	胡慧慧, 付盼盼, 李杰, 闫尊强, 高小莉, 杨姣姣, 黄晓宇. 合作猪TRIF基因CDS区克隆鉴定及组织表达分析[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(4): 1478-1487.
[15]	张莹, 陈广振, 刘梅, 李红霞, 俞燕, 贾雪波, 李雯倩, 范建华, 马志禹. 半番鸭NMB基因克隆、生物信息学和组织表达分析[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(4): 1705-1715.