种公牛个体识别与鉴定方法研究

›› 2012, Vol. 39 ›› Issue (1): 159-163.

种公牛个体识别与鉴定方法研究

赖寿贵^1,2, 刘丑生², 何高明¹, 邱小田², 刘刚², 韩旭²

1. 石河子大学,新疆石河子 832003;2. 全国畜牧总站畜禽资源保存利用中心,北京 100193

收稿日期:2011-04-08 修回日期:1900-01-01 出版日期:2012-01-20 发布日期:2012-01-20
通讯作者: 刘丑生, 何高明

Survey of Method on Individual Identification and Test about Breeding Oxen

LAI Shou-gui^1,2, LIU Chou-sheng², HE Gao-ming¹, QIU Xiao-tian², LIU Gang², HAN Xu²

1. Shihezi University, Shihezi 832003,China;2. National Center for Preservation and Utilization of Genetic Resources of Domestic Animals, National Animal Husbandry Service, Beijing 100193,China

Received:2011-04-08 Revised:1900-01-01 Online:2012-01-20 Published:2012-01-20

摘要/Abstract

摘要： 本研究采用正交试验法摸索出适于multiple-primer PCR的反应体系中物质成分及其浓度和采用排列组合方法排除干扰引物。结果表明,在10×Buffer(Tris-HCl 100 mmol/L和KCl 500 mmol/L,pH=9.7) 2.5 μL、DDT为8 mmol/L、dNTP为0.8 mmol/L、MgCl₂为2.6 mmol/L、5%甘油、0.25%二甲亚砜和0.5%甲酰胺,Taq酶10 U的25 μL的反应体系中,能够成功为总量为32 pmol/L的11对互不影响的微卫星引物进行multiple-primer PCR。通过这种方法,多个微卫星位点可以同时进行PCR,极大地提高了种公牛个体识别与鉴定的工作效率。

关键词: 多引物PCR; 微卫星; 个体识别

Abstract: This paper studied ingredients and concentration of multiple-primer PCR by orthogonal design and removed interference primer by permutation and combination. Result demonstrated that we successed to set up the system of multiple-primer PCR in reaction system which included 2.5 μL 10×Buffer(100 mmol/L Tris-HCl,500 mmol/L KCl, pH=9.7),8 mmol/L DDT,2.6 mmol/L MgCl₂,0.8 mmol/L dNTP, 5% glycerol, 0.25% dimethy sulfoxide, 0.5% formamide and Taq polymerase 10 U. It could provide biology respond for interfering 11 pair primers. So it improved the efficiency of individual identification and superintend the marker of animal husbandry through against fake semen.

Key words: multiple-primer PCR; satellites; individual identification

中图分类号:

S813.1

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