定量检测牛雌性发育候选基因FOXL2表达方法的建立

›› 2012, Vol. 39 ›› Issue (1): 1-5.

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定量检测牛雌性发育候选基因FOXL2表达方法的建立

徐超^1,2, 杜卫华², 赵家平¹, 余大为², 王栋², 郝海生², 李光玉¹, 朱化彬²

1. 中国农业科学院特产研究所,吉林吉林 132109;2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京 100193

收稿日期:2011-06-20 修回日期:1900-01-01 出版日期:2012-01-20 发布日期:2012-01-20
通讯作者: 朱化彬

Construction of Bovine Sex Related Genes FOXL2 Standard Plasmid and Standard Curve by Real-time RT-PCR

XU Chao^1,2, DU Wei-hua², ZHAO Jia-ping¹, YU Da-wei², WANG Dong², HAO Hai-sheng², LI Guang-yu¹, ZHU Hua-bin²

1. Institute of Special Economic Animals and Plants,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Jilin 132109,China;2. Institute of Animal Sciences,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100193,China

Received:2011-06-20 Revised:1900-01-01 Online:2012-01-20 Published:2012-01-20

摘要/Abstract

摘要： 本研究根据GenBank中登录的剂量敏感的翼状螺旋/叉头转录因子2(forkhead transcription factor 2,FOXL2)设计引物,构建包含FOXL2基因cDNA片段的质粒,作为中国荷斯坦牛FOXL2基因mRNA定量检测的标准品,建立了FOXL2基因mRNA 表达实时荧光定量PCR检测方法。结果表明,该方法特异性好,检测灵敏度达10¹拷贝,线性范围为10¹~10⁶拷贝,阈值循环数(Ct)与PCR体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系(r=0.998689),扩增效率高(E=99.62%),可以作为检测牛FOXL2基因mRNA定量检测方法。

关键词: FOXL2基因; 荧光定量PCR; TaqMan探针; 标准曲线

Abstract: The primer was designed based on forkhead transcription factor 2(FOXL2), according to the sequence which was submitted on GenBank. A recombinant plasmid contained cDNA fragment of FOXL2 gene was constructed and used for the standard substance for quantitative detection of mRNA of the FOXL2 gene of Holstein, a Real-time PCR was developed for detection of FOXL2 gene. The results revealed this method had a good specificity, and the sensitivity was up to 10¹, range from 10¹ to 10⁶. The cutoff value Ct had a good linear correlation with PCR samples. This method can detecte FOXL2 gene in bovine quantitatively.

Key words: FOXL2 gene; Real-time quantitative PCR; TaqMan probe; standard curve

中图分类号:

Q786

徐超;杜卫华;赵家平;余大为;王栋;郝海生;李光玉;朱化彬. 定量检测牛雌性发育候选基因FOXL2表达方法的建立[J]. , 2012, 39(1): 1-5.

XU Chao;DU Wei-hua;ZHAO Jia-ping;YU Da-wei;WANG Dong;HAO Hai-sheng;LI Guang-yu;ZHU Hua-bin. Construction of Bovine Sex Related Genes FOXL2 Standard Plasmid and Standard Curve by Real-time RT-PCR[J]. China Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2012, 39(1): 1-5.

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定量检测牛雌性发育候选基因FOXL2表达方法的建立

Construction of Bovine Sex Related Genes FOXL2 Standard Plasmid and Standard Curve by Real-time RT-PCR

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